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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » THP-1复苏的问题
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monicacatt

新虫 (初入文坛)

[求助] THP-1复苏的问题

我复苏这个细胞的时候总是不成功。每次我复苏过后，第二天镜下观察细胞就会变黑，胞内颗粒物质明显。之后一周细胞虽然没有破裂但是也无增殖。我采取一些网站上的方法，比如将细胞瓶直立培养、加20%FBS、复苏后第二天再离心去除进行DMSO等，但成效甚微。之前冻存的细胞都难以复苏成功。我的冻存方法是DMSO:FBS=1:9，梯度冻存第二天转移到液氮。细胞密度2-4*106。

有一次我只冻了半个月，拿出来复苏就成功了。但只有那一次，那一次也没有变黑，就是慢慢长起来了。

现在我的实验已经搁置很久了，有没有北京地区的好心人可以给我一株状态比较好的THP-1细胞，如果有的话我真的非常感激！！
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1楼 2018-06-28 15:39:51
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shgnsw

木虫 (著名写手)
第二天就转液氮的话，应该保存个一年多点基本不会有问题，估计是梯度冻存的时候出现了问题，建议可以去买个程序冻存盒也就几百块钱，用起来省事冻存复苏效果也比较好

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2楼2018-06-28 19:01:28
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小猛女友

新虫 (小有名气)
是准备做极化？

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3楼2018-06-28 22:36:36
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D_Qian

新虫 (初入文坛)
我的THP-1也养不好，而且在没有经过PMA诱导之前，就老是出现贴壁和聚团的现象，这是为什么呀

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4楼2018-07-26 10:01:03
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D_Qian

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shgnsw at 2018-06-28 19:01:28
第二天就转液氮的话，应该保存个一年多点基本不会有问题，估计是梯度冻存的时候出现了问题，建议可以去买个程序冻存盒也就几百块钱，用起来省事冻存复苏效果也比较好
...

我的THP-1也养不好，而且在没有经过PMA诱导之前，就老是出现贴壁和聚团的现象，这是为什么呀???

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5楼2018-07-26 10:01:36
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娜小妞1306

新虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by monicacatt at 2018-06-28 15:39:51
我复苏这个细胞的时候总是不成功。每次我复苏过后，第二天镜下观察细胞就会变黑，胞内颗粒物质明显。之后一周细胞虽然没有破裂但是也无增殖。我采取一些网站上的方法，比如将细胞瓶直立培养、加20%FBS、复苏后第二天 ...

我的也是这样

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6楼2018-12-25 15:06:07
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zwj1021

新虫 (初入文坛)
聚团细胞是状态不好的吗

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7楼2021-12-06 23:03:39
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jmqt7140

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2021-12-22 11:37:15
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