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THP-1复苏的问题
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我复苏这个细胞的时候总是不成功。每次我复苏过后,第二天镜下观察细胞就会变黑,胞内颗粒物质明显。之后一周细胞虽然没有破裂但是也无增殖。我采取一些网站上的方法,比如将细胞瓶直立培养、加20%FBS、复苏后第二天再离心去除进行DMSO等,但成效甚微。之前冻存的细胞都难以复苏成功。我的冻存方法是DMSO:FBS=1:9,梯度冻存第二天转移到液氮。细胞密度2-4*106。 有一次我只冻了半个月,拿出来复苏就成功了。但只有那一次,那一次也没有变黑,就是慢慢长起来了。 现在我的实验已经搁置很久了,有没有北京地区的好心人可以给我一株状态比较好的THP-1细胞,如果有的话我真的非常感激!! |
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shgnsw
木虫 (著名写手)
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第二天就转液氮的话,应该保存个一年多点基本不会有问题,估计是梯度冻存的时候出现了问题,建议可以去买个程序冻存盒也就几百块钱,用起来省事冻存复苏效果也比较好 发自小木虫Android客户端 |
2楼2018-06-28 19:01:28
3楼2018-06-28 22:36:36
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