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THP-1复苏的问题
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我复苏这个细胞的时候总是不成功。每次我复苏过后，第二天镜下观察细胞就会变黑，胞内颗粒物质明显。之后一周细胞虽然没有破裂但是也无增殖。我采取一些网站上的方法，比如将细胞瓶直立培养、加20%FBS、复苏后第二天再离心去除进行DMSO等，但成效甚微。之前冻存的细胞都难以复苏成功。我的冻存方法是DMSO:FBS=1:9，梯度冻存第二天转移到液氮。细胞密度2-4*106。 有一次我只冻了半个月，拿出来复苏就成功了。但只有那一次，那一次也没有变黑，就是慢慢长起来了。 现在我的实验已经搁置很久了，有没有北京地区的好心人可以给我一株状态比较好的THP-1细胞，如果有的话我真的非常感激！！ |
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第二天就转液氮的话，应该保存个一年多点基本不会有问题，估计是梯度冻存的时候出现了问题，建议可以去买个程序冻存盒也就几百块钱，用起来省事冻存复苏效果也比较好 发自小木虫Android客户端 |
2楼2018-06-28 19:01:28