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CPC1985新虫 (初入文坛)
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[交流]
BL21表达融合蛋白后,成了温度敏感,出现细胞破碎,求助可能原因
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最近在用BL21表达自己的融合蛋白GST-fusion protein,但很奇怪,有几个单克隆转到26度诱导后,开始的一个小时左右OD值有所增加,再过一个小时就看见培养基已经变得比较清了,很明显的发现细菌数减少。开始怀疑是IPTG的毒害作用,也曾用不同的IPTG浓度,发现就是不加IPTG的对照管里也出现了细菌裂解的现象。然而37度的对照组长的很好,OD值增加。 如果里面的细菌还有,继续放回37度复壮过夜,第二天就会发现培养基又混浊了。 奇怪的是如果再把他转到26度,他就不再出现以上细菌裂解的现象了。 真的一头的雾水, 很希望能听听各位大侠的猜测和建议。我现在都提不出可靠的假设,但这东西真的蛮有意思的。本来以为是自己的操作出问题,后来发现他的重复性还蛮高的。所以挺感兴趣。 小弟很希望听听大家的高见~~~~: |
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很希望能听听各位大侠的猜测和建议。我现在都提不出可靠的假设,但这东西真的蛮有意思的。
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