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九加七

新虫 (初入文坛)


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Southern blot
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请教Southern blot,做过的大佬们帮帮忙。
我是跑S1-PFGE的胶做杂交,方法是参考文献和说明书做的。
首先先用的0.25M 的稀盐酸脱嘌呤(分子量大),再用0.4M的NaOH变性2次,再过夜转膜
用10X SSC洗一下,放在滤纸上,120度 30min固定
再用水洗一下,自然风干后,42度预杂交1h,再用杂交液过夜杂交
然后检测都是按说明书做的,拍的照却啥都没有,不知道哪里出了问题
做普通电泳出来的目的纯条带是能杂交出来条带的,就是做S1-PFGE这块胶,一直做不出来,膜上什么都没有。

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奋斗o小青年

新虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我这两天在做western blot

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8楼2018-06-27 12:55:00
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卢猫

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,请问做出来了吗?

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9楼2018-07-24 09:00:44
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huangqiuling

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我最近也在做Southern,结果总是阳性对照信号强,但样品的信号很弱,加大DNA酶切量,30 v电压后条带严重扭曲,郁闷!!!
10楼2018-11-22 14:56:49
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2018-06-27 11:00   回复  
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C104140163楼
2018-06-27 11:00   回复  
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pandongzi6楼
2018-06-27 11:09   回复  
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yuanswu5楼
2018-06-27 11:01   回复  
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2018-06-27 11:14   回复  
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