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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR碱基缺失
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木头马尾～～

新虫 (初入文坛)
已领完
PCR碱基缺失
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本人从质粒模板上扩增一段550bp的片段，下游引物（46bp）设计时在5'端加入了与模板不匹配的25个碱基（后期做拼接用），扩增用的是taq高保真酶，产物连t载体测序发现除了和模板不匹配的25个碱基外都比对正确，有没有虫友可以帮忙解释一下

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1楼2018-06-26 12:01:26
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木头马尾～～

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-06-26 14:16:43
产物连t载体测序发现除了和模板不匹配的25个碱基外都比对正确，你的意思是指那25个碱基缺失了？

感谢回复。已解决！我是用了重新设计的引物（未加入那25个碱基）扩出来的片段，而我用的是加了25个碱基的序列作为母本进行的比对，糊涂糊涂

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10楼2018-06-26 15:31:25
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渊博震天

版主 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-06-27 07:49:44
产物连t载体测序发现除了和模板不匹配的25个碱基外都比对正确，你的意思是指那25个碱基缺失了？
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木头马尾～～
9楼2018-06-26 14:16:43
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C104140163楼
2018-06-26 12:01   回复  
木头马尾～～(金币+5): 谢谢参与
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hdchina20104楼
2018-06-26 12:01   回复  
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pandongzi7楼
2018-06-26 12:04   回复  
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多浩2楼
2018-06-26 12:01   回复  
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星间雨辰8楼
2018-06-26 12:06   回复  
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润色论文6楼
2018-06-26 12:03   回复  
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等效热环境5楼
2018-06-26 12:02   回复  
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