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木头马尾~~

新虫 (初入文坛)


已领完
PCR碱基缺失
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本人从质粒模板上扩增一段550bp的片段,下游引物(46bp)设计时在5'端加入了与模板不匹配的25个碱基(后期做拼接用),扩增用的是taq高保真酶,产物连t载体测序发现除了和模板不匹配的25个碱基外都比对正确,有没有虫友可以帮忙解释一下

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-06-27 07:49:44
产物连t载体测序发现除了和模板不匹配的25个碱基外都比对正确,你的意思是指那25个碱基缺失了?

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9楼2018-06-26 14:16:43
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木头马尾~~

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
9楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-06-26 14:16:43
产物连t载体测序发现除了和模板不匹配的25个碱基外都比对正确,你的意思是指那25个碱基缺失了?

感谢回复。已解决!我是用了重新设计的引物(未加入那25个碱基)扩出来的片段,而我用的是加了25个碱基的序列作为母本进行的比对,糊涂糊涂

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10楼2018-06-26 15:31:25
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多浩2楼
2018-06-26 12:01   回复  
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C104140163楼
2018-06-26 12:01   回复  
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pandongzi7楼
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