24小时热门版块排行榜    

查看: 2638  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

草哥cium

新虫 (正式写手)

[求助] 菌摇久了会影响表达吗。 已有1人参与

bl21.单菌落.准备摇起来做甘油菌,以后拿出来一点扩大培养做表达的。。。今天早上开始摇10:30。。晚上忘记取出来了,估计得明天8:30才能取出来,这样子摇久了会不会影响,会不会死完,,或者影响以后1:100扩大培养表达

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
肯定会影响,你明天8:30拿出来,在转接下,培养4,5个小时就可以了。祝顺利。
3楼2018-06-25 13:30:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

司马错

铜虫 (正式写手)

会影响菌种活力,不如你早晨转接一下,重新培养晚上部分保种,部分再转,次日扩大培养,如果有能加抗生素那是一定要加的。

发自小木虫Android客户端
优秀成为习惯
2楼2018-06-25 00:49:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

最好是菌处于对数增长期,刚刚达到平稳期保菌比较好,我们的操作基本上单菌落摇不超过12小时,另外BL21里面如果载体是Amp抗性,摇久了很容易质粒丢失,因为摇久了菌分泌的酶完全可以降解青霉素使得抗生素根本没有选择压力。所以质粒丢失的菌体仍然会疯长。不要嫌麻烦,将菌按1:1000重新接菌摇一下比较保险。

发自小木虫Android客户端
4楼2018-06-25 18:31:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草哥cium

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-06-25 18:31:17
最好是菌处于对数增长期,刚刚达到平稳期保菌比较好,我们的操作基本上单菌落摇不超过12小时,另外BL21里面如果载体是Amp抗性,摇久了很容易质粒丢失,因为摇久了菌分泌的酶完全可以降解青霉素使得抗生素根本没有选 ...

我的是kan+的。。是不是质粒一般丢失概率不大。。

发自小木虫Android客户端
5楼2018-06-25 23:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:38 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:38 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:08 by lotyj5cz79
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 3/150 2026-02-18 06:53 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错,点赞! +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题,请指教! 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[基金申请] 情人节自我反思:在爱情中有过遗憾吗? +4 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-15 22:28 by baiboxie
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
请填处理意见