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chinatokorea

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 诚恳求助: 制作polyacrylamide gel (fused silica)capillary 过程中遇到的问题.

本人最近制作polyacrylamide-gel capillary, 以其充当导体的作用, 即将已经填充好gel的capillary两端分别浸入buffer, 并apply the electric field across the capillary.

正如大家所知, 在电场的作用下, 离子可以在gel中移动, 而bulk solution则不能通过gel, 这样它就起到了导体的作用了.

本人采用的gel配方如下(化学聚合的方式):
acrylamide/bisacrylamide (1)10%T 5%C (2) 5%T 5%C 共配制了两种不同溶液
APS(ammonium persulfate)
TEMED (tetramethylethylenediamine)

可是在制作过程中遇到了难题, 让我摸不着头脑也很上火: 将degassed prepolymer 灌入capillary后, 无论等待多长时间(一天, 还是五天), 当我trim 毛细管两端之后, 刚刚露在外边的gel就像水挥发了似的, 很快就在两端出现了一小段空管区, 而根据我的实验要求, 这种情况是不允许的, 因为这样的话, capillary内的gel就会和capillary外的buffer围出一个bubble, 而这个bubble会在capillary通电过程中受外力作用移动, 最终破坏capillary内部的gel......

我也试过用商用的UV诱导gel灌capillary, 可是结果还是一样....头痛呀...

希望坛子里的兄弟姐妹们, 能帮忙解决这个问题.....不胜感激......

我想研究过capillary gel electrophoresis的同行们, 应该会知道如何解决这个问题吧......等待中.....


[ Last edited by chinatokorea on 2009-3-27 at 23:11 ]
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chinatokorea

铁杆木虫 (著名写手)

顶一下......期待大家的指点......
2楼2009-03-28 15:24:26
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chinatokorea

铁杆木虫 (著名写手)

再小顶一下....
3楼2009-03-28 20:35:34
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chinatokorea

铁杆木虫 (著名写手)

顶一下吧....哎...
4楼2009-03-29 11:56:33
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chinatokorea

铁杆木虫 (著名写手)

5楼2009-03-29 21:52:48
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chinatokorea

铁杆木虫 (著名写手)

再顶....
6楼2009-03-30 23:49:10
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chinatokorea

铁杆木虫 (著名写手)

顶....
7楼2009-04-01 08:37:54
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chinatokorea

铁杆木虫 (著名写手)

8楼2009-04-05 20:44:09
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