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芥末本绿

金虫 (正式写手)

[求助] 真核表达质粒构建

目的蛋白基因在真核载体表达的时候,目的基因末端有TAA,TAA前面为信号肽序列,扩增目的基因时是否还需要添加终止密码?
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渊博震天

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信号肽在目的基因的3’端?3’端有纯化标签不?
2楼2018-06-23 14:02:34
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芥末本绿

金虫 (正式写手)

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2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-06-23 14:02:34
信号肽在目的基因的3’端?3’端有纯化标签不?

没有,表达的蛋白不需要纯化,就在人的细胞里面表达就行

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3楼2018-06-26 08:31:12
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3楼: Originally posted by 芥末本绿 at 2018-06-26 08:31:12
没有,表达的蛋白不需要纯化,就在人的细胞里面表达就行
...

不添加终止密码子了
4楼2018-06-26 08:33:29
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芥末本绿

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引用回帖:
4楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-06-26 08:33:29
不添加终止密码子了...

自身带的就够用是吧?因为这个信号肽比较重要

发自小木虫IOS客户端
5楼2018-06-26 08:34:31
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引用回帖:
5楼: Originally posted by 芥末本绿 at 2018-06-26 08:34:31
自身带的就够用是吧?因为这个信号肽比较重要
...

不添加
6楼2018-06-26 08:36:34
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渊博震天

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或者不放心的话,你可以同时构建两个,一个不加直接扩,另外一个加上。因为分子生物学的实验谁也说不准。
7楼2018-06-26 08:38:42
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