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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 真核表达质粒构建
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芥末本绿

金虫 (正式写手)

[求助] 真核表达质粒构建

目的蛋白基因在真核载体表达的时候，目的基因末端有TAA，TAA前面为信号肽序列，扩增目的基因时是否还需要添加终止密码？
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1楼 2018-06-23 10:10:12
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

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信号肽在目的基因的3’端？3’端有纯化标签不？
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2楼2018-06-23 14:02:34
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芥末本绿

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-06-23 14:02:34
信号肽在目的基因的3’端？3’端有纯化标签不？

没有，表达的蛋白不需要纯化，就在人的细胞里面表达就行

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3楼2018-06-26 08:31:12
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

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3楼: Originally posted by 芥末本绿 at 2018-06-26 08:31:12
没有，表达的蛋白不需要纯化，就在人的细胞里面表达就行
...

不添加终止密码子了
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4楼2018-06-26 08:33:29
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芥末本绿

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-06-26 08:33:29
不添加终止密码子了...

自身带的就够用是吧？因为这个信号肽比较重要

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5楼2018-06-26 08:34:31
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

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引用回帖:
5楼: Originally posted by 芥末本绿 at 2018-06-26 08:34:31
自身带的就够用是吧？因为这个信号肽比较重要
...

不添加
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6楼2018-06-26 08:36:34
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
或者不放心的话，你可以同时构建两个，一个不加直接扩，另外一个加上。因为分子生物学的实验谁也说不准。
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7楼2018-06-26 08:38:42
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