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lzyer

铁虫 (初入文坛)

[交流] 液相检测发酵上清液中有机酸的问题 已有2人参与

我用液相检测细菌发酵上清液中的有机酸,在2-5min总有一堆峰重叠在一起,而且基线会上漂,随后基线又下降保持平稳。
流动相   A磷酸(pH 3)-B甲醇
洗脱       0-18min  85%A-15%B
流速       0.8mL/min
我现在该怎么调整流动相使峰分离呢?

现在尝试过A:B= 60:40     70:30     80:20,磷酸pH=2.3  2.5等条件,都不太理想,请大神指点一下该怎么调整。
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繁夏

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直接测杂质多,分析发酵液有哪几种酸,先跑一下这几种酸的出峰

发自小木虫Android客户端
2楼2018-06-22 16:04:44
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lzyer

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 繁夏 at 2018-06-22 16:04:44
直接测杂质多,分析发酵液有哪几种酸,先跑一下这几种酸的出峰

目标酸的单标都走过样,走的没问题,但是样品里成分复杂,杂峰很多,导致杂峰跟目标峰重叠
3楼2018-06-22 16:27:44
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繁夏

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by lzyer at 2018-06-22 16:27:44
目标酸的单标都走过样,走的没问题,但是样品里成分复杂,杂峰很多,导致杂峰跟目标峰重叠...

改分离条件,或者除一下杂

发自小木虫Android客户端
4楼2018-06-22 17:05:07
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柳絮虫

新虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by lzyer at 2018-06-22 16:27:44
目标酸的单标都走过样,走的没问题,但是样品里成分复杂,杂峰很多,导致杂峰跟目标峰重叠...

发酵液,干扰物质太多,有时候会干扰到定性。既然想检测有机酸,似乎先富集纯化一下比较好。最简单的方法就是过离子交换柱。
5楼2018-06-23 08:40:54
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