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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相检测发酵上清液中有机酸的问题
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lzyer

铁虫 (初入文坛)

[交流] 液相检测发酵上清液中有机酸的问题 已有2人参与

我用液相检测细菌发酵上清液中的有机酸，在2-5min总有一堆峰重叠在一起，而且基线会上漂，随后基线又下降保持平稳。
流动相   A磷酸（pH 3）-B甲醇
洗脱       0-18min  85%A-15%B
流速       0.8mL/min
我现在该怎么调整流动相使峰分离呢？

现在尝试过A:B= 60:40     70:30     80:20，磷酸pH=2.3  2.5等条件，都不太理想，请大神指点一下该怎么调整。
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1楼 2018-06-22 15:37:29
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繁夏

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直接测杂质多，分析发酵液有哪几种酸，先跑一下这几种酸的出峰

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2楼2018-06-22 16:04:44
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lzyer

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 繁夏 at 2018-06-22 16:04:44
直接测杂质多，分析发酵液有哪几种酸，先跑一下这几种酸的出峰

目标酸的单标都走过样，走的没问题，但是样品里成分复杂，杂峰很多，导致杂峰跟目标峰重叠
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3楼2018-06-22 16:27:44
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繁夏

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3楼: Originally posted by lzyer at 2018-06-22 16:27:44
目标酸的单标都走过样，走的没问题，但是样品里成分复杂，杂峰很多，导致杂峰跟目标峰重叠...

改分离条件，或者除一下杂

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4楼2018-06-22 17:05:07
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柳絮虫

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3楼: Originally posted by lzyer at 2018-06-22 16:27:44
目标酸的单标都走过样，走的没问题，但是样品里成分复杂，杂峰很多，导致杂峰跟目标峰重叠...

发酵液，干扰物质太多，有时候会干扰到定性。既然想检测有机酸，似乎先富集纯化一下比较好。最简单的方法就是过离子交换柱。
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5楼2018-06-23 08:40:54
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