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请问cflagpcDNA3的具体结构功能 已有1人参与
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请问这个质粒的flag是什么作用，为什么要叫cflag? 为什么会有这么多启动子，pCMV T7 sp6 SV40？各自的位置有什么讲究吗？各自的作用是什么？ 然后新霉素的具体筛选机制和作用也不是很懂。 还有图谱上的箭头又是什么意思呢？ 小白一只，求大神指点 发自小木虫IOS客户端 |
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【答案】应助回帖
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载体是pcDNA3-flag-c吗？？？这个是说明FLAG标签在C端。 FLAG标签是一段由8个氨基酸残基组成的, N-DYKDDDDK-C (1012 Da), 其作用是标记标签. 在蛋白表达和定位研究中, 可以通过基因工程技术手段将所要研究的目的基因和FLAG-tag基因序列连接起来,可以连接在目的蛋白的C端或N端, 然后将整合后的基因转入细胞中或胚胎干细胞抑或受精卵中. 后续检测主要通过FLAG-tag这段肽链形成的免疫决定簇与其单克隆抗体的特异性结合来实现. 检测手段有免疫荧光(immunofluorescence), 免疫印记(Western Blotting)等. CMV,T7,SC40这些启动子是启动后面的基因的。 |
2楼2018-06-12 09:46:33
3楼2018-06-12 19:55:01