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豆豆娃娃

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问cflagpcDNA3的具体结构功能已有1人参与

请问这个质粒的flag是什么作用,为什么要叫cflag?
为什么会有这么多启动子,pCMV T7 sp6 SV40?各自的位置有什么讲究吗?各自的作用是什么?
然后新霉素的具体筛选机制和作用也不是很懂。
还有图谱上的箭头又是什么意思呢?
小白一只,求大神指点

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阿门阿前1991

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
载体是pcDNA3-flag-c吗???这个是说明FLAG标签在C端。

FLAG标签是一段由8个氨基酸残基组成的, N-DYKDDDDK-C (1012 Da), 其作用是标记标签. 在蛋白表达和定位研究中, 可以通过基因工程技术手段将所要研究的目的基因和FLAG-tag基因序列连接起来,可以连接在目的蛋白的C端或N端, 然后将整合后的基因转入细胞中或胚胎干细胞抑或受精卵中. 后续检测主要通过FLAG-tag这段肽链形成的免疫决定簇与其单克隆抗体的特异性结合来实现. 检测手段有免疫荧光(immunofluorescence), 免疫印记(Western Blotting)等.

CMV,T7,SC40这些启动子是启动后面的基因的。
总会出现一个温柔的人,让你变得温暖,然后默默离开。
2楼2018-06-12 09:46:33
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豆豆娃娃

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 阿门阿前1991 at 2018-06-12 09:46:33
载体是pcDNA3-flag-c吗???这个是说明FLAG标签在C端。

FLAG标签是一段由8个氨基酸残基组成的, N-DYKDDDDK-C (1012 Da), 其作用是标记标签. 在蛋白表达和定位研究中, 可以通过基因工程技术手段将所要研究的目的 ...

是的。谢谢大神解答

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3楼2018-06-12 19:55:01
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