| 查看: 1511 | 回复: 3 | |||
[求助]
PC12细胞
|
|
PC12高分化的细胞，在冻存之后，很难复苏，冻存条件是：100μLDMSO+900μL的小牛血清，放于冻存管后，4度30min，-20℃，30min，保存于-80 中。复苏的方法：将冻存管放于37度培养箱，溶解后，转移至无菌离心管，800rpm，3min，弃去上清，加10ml培养液，制备细胞悬液，吸取100μL细胞悬液，放于9ml培养液中，37度,5%CO2培养。 还有一个问题，做CCK8的时候，加药组的细胞活性很高，当时没有观察细胞形态。当在培养皿中培养时，发现加药组的细胞都死了，非常忧伤。 求各位大神指教，刚接触细胞，有很多点还不清楚。 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
考博求助
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有5人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有9人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有10人回复
shgnsw
木虫 (著名写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 4578.4
- 红花: 17
- 沙发: 1
- 帖子: 1135
- 在线: 339.1小时
- 虫号: 6992512
- 注册: 2017-07-26
- 专业: 细胞、亚细胞结构与功能
|
冻存的时候不都是胎牛血清么，复苏起来可以不离心直接加10ml完全培养基放培养瓶培养就行，另外你那边只吸取100ul放入9ml培养液中这个比例太稀了细胞应该很难长起来 发自小木虫Android客户端 |
2楼2018-06-14 08:48:23
shangfusheng
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 6724.4
- 散金: 868
- 红花: 13
- 沙发: 4
- 帖子: 3493
- 在线: 399.9小时
- 虫号: 2974142
- 注册: 2014-02-18
- 性别: GG
- 专业: 抗肿瘤药物药理
|
冻存用胎牛血清，复苏细胞流程没错，不过一管细胞只能放一个培养皿中，先把细胞活化起来，等传了两三代之后细胞活力好了，在铺板做实验尽量铺40%左右，这样两三天细胞密度就达到实验要求了可以加药处理了。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2018-06-14 21:42:17
shangfusheng
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 6724.4
- 散金: 868
- 红花: 13
- 沙发: 4
- 帖子: 3493
- 在线: 399.9小时
- 虫号: 2974142
- 注册: 2014-02-18
- 性别: GG
- 专业: 抗肿瘤药物药理
4楼2018-06-14 21:43:47
