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PC12细胞
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PC12高分化的细胞，在冻存之后，很难复苏，冻存条件是：100μLDMSO+900μL的小牛血清，放于冻存管后，4度30min，-20℃，30min，保存于-80 中。复苏的方法：将冻存管放于37度培养箱，溶解后，转移至无菌离心管，800rpm，3min，弃去上清，加10ml培养液，制备细胞悬液，吸取100μL细胞悬液，放于9ml培养液中，37度,5%CO2培养。 还有一个问题，做CCK8的时候，加药组的细胞活性很高，当时没有观察细胞形态。当在培养皿中培养时，发现加药组的细胞都死了，非常忧伤。 求各位大神指教，刚接触细胞，有很多点还不清楚。 |
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shgnsw
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冻存的时候不都是胎牛血清么，复苏起来可以不离心直接加10ml完全培养基放培养瓶培养就行，另外你那边只吸取100ul放入9ml培养液中这个比例太稀了细胞应该很难长起来 发自小木虫Android客户端 |
2楼2018-06-14 08:48:23
shangfusheng
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冻存用胎牛血清，复苏细胞流程没错，不过一管细胞只能放一个培养皿中，先把细胞活化起来，等传了两三代之后细胞活力好了，在铺板做实验尽量铺40%左右，这样两三天细胞密度就达到实验要求了可以加药处理了。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2018-06-14 21:42:17
shangfusheng
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4楼2018-06-14 21:43:47