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Stem cells

新虫 (初入文坛)

[求助] Western（需要有经验的人士） 已有1人参与

亲们做Western，有没有特别权威的protocol,连带有详细的注意事项的那种，刚刚接触这个，关于根据分子量选择转膜时间有没有一个详细的标准，我做的蛋白350KD，万分感谢，

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1楼 2018-06-10 10:36:44
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棍子168

至尊木虫 (著名写手)
你的蛋白太大，普通的western做不了的，最多100多，有个全自动wes这个仪器可以做

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天道酬勤
2楼2018-06-10 17:43:29
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Stem cells

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 棍子168 at 2018-06-10 17:43:29
你的蛋白太大，普通的western做不了的，最多100多，有个全自动wes这个仪器可以做

内参的上样量细胞要多少？

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3楼2018-06-11 19:43:19
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棍子168

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Stem cells at 2018-06-11 19:43:19
内参的上样量细胞要多少？
...

常规做western的蛋白浓度，每次上样只需要300nl

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天道酬勤
4楼2018-06-11 20:58:39
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Stem cells

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 棍子168 at 2018-06-11 20:58:39
常规做western的蛋白浓度，每次上样只需要300nl
...

300nl?

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5楼2018-06-11 22:11:39
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
8%分离胶，200 mA/90 min转膜
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6楼2018-06-12 13:56:06
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shangfusheng

铁杆木虫 (职业作家)
你这个蛋白太大了，一般实验室根本没法做。

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一叶放绿一叶寻，一花盛开一代芬。一生相思为一人，一同为伴又一春。
7楼2018-06-14 21:22:12
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