应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 透明质酸酶抑制实验——请问有人成功完成透明质酸酶的抑制实验吗？求指点关键步骤！
老同志的第一次SCI投稿经历，对新人极具参考价值！
51/1返回列表
查看: 3897  |  回复: 24
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者yuruj将赠送您 50 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yuruj

金虫 (正式写手)

[求助] 透明质酸酶抑制实验——请问有人成功完成透明质酸酶的抑制实验吗？求指点关键步骤！已有3人参与

各位虫友，请问有人成功完成透明质酸酶的抑制实验吗？求指点关键步骤！
本人用的是以下方法：取0. 1mLCaCl2 溶液( 0. 25mmol/ L) 和0. 5mL 透明质酸酶液37℃ 保温培养20min; 加入样品液0. 5mL,37℃ 保温培养20min; 加入0. 5mL透明质酸钠液37℃􀀁 保温30min, 常温放置5min; 加入0. 1mLN aOH 溶液( 0. 4mol/ L) 和0. 5mL乙酰丙酮溶液, 置于沸水浴中加热15min 后立即冷却5min;
加入埃尔利希试剂1. 0mL 并用3. 0mL 无水乙醇进行稀释,放置20min 显色, 测定吸光度。                                                                                                               透明质酸酶抑制率( %) =( A- B) - ( C- D)/(A- B)* 100% (
式中: A 为对照溶液ABS 值( 用醋酸缓冲溶液代替样品溶液) ; B 为对照空白溶液ABS 值( 用醋酸缓冲溶液代替样品溶液及酶液) ; C 为试样溶液A BS 值; D 为试样空白溶液ABS 值( 用醋酸缓冲溶液代替酶液) 。
最终结果是A、B、C、D吸光值均很低，相差不大。
我在考虑是否该反应未发生？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼2018-06-08 16:25:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuruj

金虫 (正式写手)
混匀了，请问你做这个反应，吸光度能达到多少呢？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2018-06-11 12:55:36
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 25 个回答

自由的风gaga

铁虫 (初入文坛)
每次加试液后混匀了没？？充分混匀。。。  再就是看看管子洗干净了没
赞一下 回复此楼
2楼2018-06-11 10:09:35
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

自由的风gaga

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by yuruj at 2018-06-11 12:55:36
混匀了，请问你做这个反应，吸光度能达到多少呢？

我现在是用CTAB来做透明质酸酶抑制的，直接上的酶标仪，拿到数据直接套公式就得出抑制率了，现在问我吸光度我也不清楚。
你用的DMAB法在乙酰丙酮溶液, 置于沸水浴中加热15min，把水浴时间增加到30~60min试试。你的有些试剂浓度跟我用的不太一样，不过应该问题不大。
建议你可以用甘草酸二钾做个阳性对照再试试
赞一下(2人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yuruj
4楼2018-06-11 14:20:18
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuruj

金虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 自由的风gaga at 2018-06-11 14:20:18
我现在是用CTAB来做透明质酸酶抑制的，直接上的酶标仪，拿到数据直接套公式就得出抑制率了，现在问我吸光度我也不清楚。
你用的DMAB法在乙酰丙酮溶液, 置于沸水浴中加热15min，把水浴时间增加到30~60min试试。你的 ...

好的，谢谢！我试试。以后请多多指教！

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2018-06-11 15:33:21
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 25 个回答
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫 论文翻译-EnPapers美助理教授团队-SCI英文润色
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 博士后和科研助理好难找啊 +11 找工作啊 2024-04-28 11/550 2024-04-30 21:48 by lizhengke06
[考博] 材料方向24博士申请/一作SCI三篇 +4 白天不碰 2024-04-24 6/300 2024-04-30 20:05 by zcczz
[教师之家] 一般发什么文章才能中青基啊 +6 保持肌肤 2024-04-29 6/300 2024-04-30 13:22 by ECOblance
[硕博家园] 有没有想聊天的 +7 兔跑儿2024 2024-04-27 10/500 2024-04-30 10:32 by 那年的旧城
[硕博家园] 科研好难啊，想退学去打工。 +25 byywnyl 2024-04-27 28/1400 2024-04-30 09:41 by 安塔瓦拉多
[分析] C18色谱柱可以分析单糖，二糖，低聚糖（3-7）吗 +5 备安网公 2024-04-26 6/300 2024-04-30 09:25 by shuiliu
[高分子] 水性聚氨酯 +4 钠与水 2024-04-28 6/300 2024-04-29 20:49 by qiyanjie1008
[基金申请] 部委直属研究所（非北京市属单位）报北自然青年基金中的概率会不会很小，有必要报吗？ 5+3 拓芙 2024-04-26 6/300 2024-04-29 17:54 by 拓芙
[基金申请] 优青已经开始了么？ +4 majunge000 2024-04-27 4/200 2024-04-29 15:46 by 潘小丫
[考博] 25年博士申请 +9 Changzixuan 2024-04-25 17/850 2024-04-29 15:10 by Napoleonsky
[考博] 博士招生-211农业院校 +6 NYC917 2024-04-26 13/650 2024-04-29 13:17 by _Loser
[论文投稿] LWT投 +5 AChen92 2024-04-26 5/250 2024-04-29 07:16 by lizhengke06
[论文投稿] Jounal of Ethnopharmacology投稿 +3 lay木子禾 2024-04-25 4/200 2024-04-28 16:58 by hanyunch
[有机交流] 以2氟甲苯为原料做2氟4溴甲苯 +3 高树桩 2024-04-24 7/350 2024-04-28 14:37 by 高树桩
[基金申请] 基金开始函评了吗？ +18 wych1103 2024-04-25 18/900 2024-04-28 13:18 by peterlizb
[有机交流] 锂盐的合成 4+3 liurui1203 2024-04-27 3/150 2024-04-28 10:45 by 591950582
[教师之家] 大学直属学院卸任的副院长退休后还享受副处级的养老待遇吗？ +6 苏东坡二世 2024-04-27 6/300 2024-04-28 08:35 by ou0551
[有机交流] 环肽的合成 +3 徐来不惊 2024-04-25 6/300 2024-04-27 13:54 by xxzhangci
[基金申请] "颜宁:基础研究应顶天立地"能做到基础研究同时顶天立地的才是牛人 +6 zju2000 2024-04-24 6/300 2024-04-27 10:17 by kcmn1000
[考研] 学硕专硕 +5 小蜗牛* 2024-04-26 5/250 2024-04-26 16:43 by 鱼翔浅底1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭