24小时热门版块排行榜    

查看: 3414  |  回复: 14
【悬赏金币】回答本帖问题,作者暴走的小鱼干将赠送您 5 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

暴走的小鱼干

新虫 (小有名气)

[求助] race引物设计问题已有4人参与

我设计好了引物,但是我看说明书发现那个15个长度的序列,请问我是要把这一段序列加在我设计的引物前面,再发给公司合成吗?

race引物设计问题


发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 生物里小可爱 at 2018-07-06 00:35:59
求助,引物怎么设计,我也用的takara的试剂盒,但是没太看懂那个原理。引物需要设计在5/3端么

GSP引物设计是这样的,首先在你已经p出来测序的中间序列中设计GSP1引物,注意别与接头引物形成稳定二聚体啥的,同时退火温度要高。GSP2设计同GSP1,GSP2是为了防止第一轮非特异性扩增而进行巢式PCR设计的引物,有时候可能需要三轮才出特异条带。GSP设计的时候尽可能接近两端,1000bp以内很容易P成功。当特异性条带出现后TA克隆去测序,出来的序列再与已知中间序列拼接即可知道完整序列。5'相对要难一些,注意RNA完整性一定要高!!!
11楼2018-07-13 13:33:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+3, 鼓励交流 2018-07-07 01:34:26
15bp那个是用来做无缝克隆连接的,需要再额外购买takara家的试剂盒,你想一步到位的话就加上。不想买的话就可以通过TA克隆来做

发自小木虫Android客户端
2楼2018-06-08 06:48:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinkairui123

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

肯定是要提供好序列啊
武汉金开瑞生物,提供核酸和蛋白的整体研究方案
3楼2018-06-14 14:55:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暴走的小鱼干

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jinkairui123 at 2018-06-14 14:55:19
肯定是要提供好序列啊

我的意思是说明书上面写的那个15bp长的序列需不需要加在我设计好的引物前面

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-06-14 17:05:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] ACS Nano投稿后分配到副编辑手里12天了,能确定送审了吗? +6 潇洒怡惜 2024-06-12 11/550 2024-06-18 01:48 by 玩耍绝缘体
[文学芳草园] 累并快乐着 +15 MYHLD521 2024-06-14 15/750 2024-06-18 01:28 by liyeqik
[考博] 2025考博 +7 自强不息a?a 2024-06-15 12/600 2024-06-17 22:51 by 自强不息a?a
[基金申请] 化学会年会改成一年开一次了? +7 babu2015 2024-06-12 15/750 2024-06-17 20:28 by 落笔画枫
[基金申请] 有人中过人文社科类的博后特助吗? +3 outsider1986 2024-06-16 4/200 2024-06-17 19:35 by outsider1986
[基金申请] 博后面上今天有bug可以看到是否资助? +22 lyfbangong 2024-06-12 33/1650 2024-06-17 16:17 by carolloo
[找工作] 江西双非一本和四川双一流高校如何选择? 5+8 寒山敲钟 2024-06-12 25/1250 2024-06-16 22:05 by zhaojiang427
[论文投稿] 二审返修送审10天了,原来一审的3个审稿人只有2个接受了审稿,会邀请新审稿人么? 50+3 huanpo116 2024-06-15 5/250 2024-06-16 10:27 by bobvan
[基金申请] 为什么我的博后基金还在流动站审核中?不会是学院给我卡了吧? +14 王凯12 2024-06-13 26/1300 2024-06-15 15:22 by 好人与坏人
[论文投稿] 求机械类四区sci推荐 5+3 迷茫小旷 2024-06-14 4/200 2024-06-15 11:25 by bobvan
[论文投稿] 投了一篇4区的SCI,审稿人一个拒稿,一个小修,编辑给了大修。 +9 安稳22123 2024-06-13 10/500 2024-06-14 23:45 by jurkat.1640
[基金申请] 面上基金有一个(两个)C是不是就没戏了.... 5+3 zzzm116 2024-06-13 17/850 2024-06-14 22:26 by lzt8076
[考研] 物理化学一对一辅导 +3 林大diao 2024-06-12 5/250 2024-06-14 20:57 by 林大diao
[基金申请] 博士后基金需要结题吗? +8 zhouchuck 2024-06-13 8/400 2024-06-14 17:27 by liuyupu132
[基金申请] 工材E口JQ有消息了吗 +4 babyduck 2024-06-11 4/200 2024-06-14 17:23 by firepick
[考博] 申博找导师 +4 疏影横斜水清浅3 2024-06-13 6/300 2024-06-14 14:31 by zxl_1105
[基金申请] 国自然基金公布的时候基金号有吗 +8 潇洒怡惜 2024-06-13 11/550 2024-06-14 11:24 by JRfei
[论文投稿] 最近写了一篇控制优化领域的文章,可以投哪里啊?有没有水一些的期刊推荐 +7 香瓜木香 2024-06-12 13/650 2024-06-14 07:05 by 香瓜木香
[考博] 博导选择 +3 bing85977 2024-06-12 3/150 2024-06-13 15:34 by 我是邱尧
[论文投稿] with editor日期变更 +3 慎独的小花卷 2024-06-12 8/400 2024-06-13 11:00 by 慎独的小花卷
信息提示
请填处理意见