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Tdftdf

新虫 (初入文坛)

[交流] 测序问题 已有3人参与

我在载体上插入多克隆位点,连上去酶切验证不对,测序也老是说我浓度低,模板有问题,刚做分子生物学,麻烦各位大神解答一下,谢谢啦

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sincere32

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果你的质粒量不低,可能是引物与质粒不识别,你没有克隆到目标序列。
2楼2018-06-06 13:56:17
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Mr.wwwwwwang

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
首先仔细检查一下你的模板是不是正确的,从别人那里拿来的东西一定要验证,另外引物是否加了保护碱基,是否有移码突变等问题,找别人帮忙看看,你也可以试试同源重组的方法试试。测序的话,你可以送菌液给公司,让他们自己提,然后返菌返质粒,如果是自己提质粒的话,那你测一下浓度,看看是不是浓度低的原因,实在不行,换家公司
初来乍到
3楼2018-06-06 14:45:14
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diaomou

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
测序公司提的质粒浓度低,你就自己提质粒

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4楼2018-06-07 00:13:03
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