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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 测序问题
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Tdftdf

新虫 (初入文坛)

[交流] 测序问题 已有3人参与

我在载体上插入多克隆位点，连上去酶切验证不对，测序也老是说我浓度低，模板有问题，刚做分子生物学，麻烦各位大神解答一下，谢谢啦

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1楼 2018-06-06 13:30:45
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sincere32

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果你的质粒量不低，可能是引物与质粒不识别，你没有克隆到目标序列。
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2楼2018-06-06 13:56:17
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Mr.wwwwwwang

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
首先仔细检查一下你的模板是不是正确的，从别人那里拿来的东西一定要验证，另外引物是否加了保护碱基，是否有移码突变等问题，找别人帮忙看看，你也可以试试同源重组的方法试试。测序的话，你可以送菌液给公司，让他们自己提，然后返菌返质粒，如果是自己提质粒的话，那你测一下浓度，看看是不是浓度低的原因，实在不行，换家公司
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初来乍到
3楼2018-06-06 14:45:14
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diaomou

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
测序公司提的质粒浓度低，你就自己提质粒

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4楼2018-06-07 00:13:03
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