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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 质粒双酶切（大神留步帮帮忙）
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native

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒双酶切（大神留步帮帮忙） 已有1人参与

为什么质粒酶切前浓度很大，切完以后个位数。
酶切位点是NdeⅠ和XhoⅠ
我酶切2小时，以后放-20了，第二天怎么让他继续切
酶加多，星活力是什么

@天使托 发自小木虫Android客户端
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1楼 2018-06-05 07:20:20
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你所说的酶切前浓度很高是用仪器测的吧？我建议你直接跑个胶用肉眼预估一下浓度再合理调整酶切体系。

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

native
2楼2018-06-05 07:23:57
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native

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-06-05 07:23:57
你所说的酶切前浓度很高是用仪器测的吧？我建议你直接跑个胶用肉眼预估一下浓度再合理调整酶切体系。

对，用仪器测的，谢谢您?

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3楼2018-06-05 08:06:13
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native

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-06-05 07:23:57
你所说的酶切前浓度很高是用仪器测的吧？我建议你直接跑个胶用肉眼预估一下浓度再合理调整酶切体系。

谢谢您，打错符号了

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4楼2018-06-05 08:06:51
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
★ ★ ★
snoopytbw: 金币+3, 非常热心 2018-06-06 07:17:10
引用回帖:
3楼: Originally posted by native at 2018-06-05 08:06:13
对，用仪器测的，谢谢您?
...

我用的小量质粒提取试剂盒，菌液为8ml的，以我自身酶切实验为例，我用的takara的quick cut 酶，每次体系为20ul，质粒DNA加入量为16ul，酶各加1ul，buffer 2ul，同时切5管跑胶回收
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5楼2018-06-05 08:53:52
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native

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-06-05 08:53:52
我用的小量质粒提取试剂盒，菌液为8ml的，以我自身酶切实验为例，我用的takara的quick cut 酶，每次体系为20ul，质粒DNA加入量为16ul，酶各加1ul，buffer 2ul，同时切5管跑胶回收...

哦哦哦我试试谢谢

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6楼2018-06-05 10:15:40
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