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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 【干货分享】WB实验问题总结与处理方案
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禁虫 (小有名气)
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1楼 2018-06-04 17:18:16
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pangpag

新虫 (初入文坛)
★
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为什么被屏蔽了呀，看不到
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8楼2018-11-19 13:57:55
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就叫Bling

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，大神！请问组织提取出来的蛋白和细胞提取出来的蛋白有很大区别吗?我细胞提取出来的蛋白做wb有结果，可是用组织跑出来，wb没有见条带，用考马斯亮蓝染色也不是很明显，感觉没有看到条带？大神有空可以帮忙解答下吗?谢谢!
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5楼2018-08-23 17:43:58
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boom星期八

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，你的帖子很详尽，我也收获很多，目前我在做蛋白诱导表达，最后离心没有沉淀，不知道什么原因。
诱导后取了1毫升菌液离心（2800r/min）取菌体，50微升PBS重悬，50微升2*上样缓冲液重悬，煮沸5~10min后冷却，上样的时候就室温溶解，138000R/min离心，此步离心应该有一些细菌离心的碎片沉淀才对吧？我的没有沉淀呢。百度了一下，没有说细菌这样裂解，沉淀有什么成分，我自己理解应该是细胞壁，以及一些细胞器，核酸等物质。
因为要判断我的蛋白是不是可溶性表达，或者有没有包涵体产生，而且本身这样做应该有沉淀出现才对，实验室没人做这方面的实验，所以自己不懂的地方很多，感谢楼主。
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3楼2018-07-26 16:13:13
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哩哩哩啦啦啦

新虫 (初入文坛)
★
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引用回帖:
6楼: Originally posted by 鸽子? at 2018-09-03 17:21:47
同学你好，我也是组织的蛋白跑不出来，你后来怎么修改的啊，交流一下吧。
...

同学你好，我也遇到了同样的问题，咱们大家可以交流一下吗？

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7楼2018-09-11 15:05:03
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全是爱1991

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主你好，我是化学专业的，最近做实验 想把配置的牛血清蛋白BSA的磷酸缓冲液转移到NC膜上，直接滴加的话NC膜不吸收，请问怎么处理可以简单有效的让NC膜吸收BSA溶液呢？我的实验不涉及细胞、电泳实验等等，忘不吝赐教！
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4楼2018-08-21 14:17:03
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普通回帖

大丸子丹

新虫 (初入文坛)
谢谢分享~好实用
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2楼2018-07-20 11:28:59
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鸽子?

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 就叫Bling at 2018-08-23 17:43:58
你好，大神！请问组织提取出来的蛋白和细胞提取出来的蛋白有很大区别吗?我细胞提取出来的蛋白做wb有结果，可是用组织跑出来，wb没有见条带，用考马斯亮蓝染色也不是很明显，感觉没有看到条带？大神有空可以帮忙解答 ...

同学你好，我也是组织的蛋白跑不出来，你后来怎么修改的啊，交流一下吧。

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6楼2018-09-03 17:21:47
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ZUOZUOYa

金虫 (正式写手)
屏蔽了看不到

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9楼2018-12-23 00:36:47
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星星不太萌

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
为什么我看的时候帖子就被屏蔽了

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10楼2019-02-24 21:48:57
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