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boom星期八

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,你的帖子很详尽,我也收获很多,目前我在做蛋白诱导表达,最后离心没有沉淀,不知道什么原因。
诱导后取了1毫升菌液离心(2800r/min)取菌体,50微升PBS重悬,50微升2*上样缓冲液重悬,煮沸5~10min后冷却,上样的时候就室温溶解,138000R/min离心,此步离心应该有一些细菌离心的碎片沉淀才对吧?我的没有沉淀呢。百度了一下,没有说细菌这样裂解,沉淀有什么成分,我自己理解应该是细胞壁,以及一些细胞器,核酸等物质。
因为要判断我的蛋白是不是可溶性表达,或者有没有包涵体产生,而且本身这样做应该有沉淀出现才对,实验室没人做这方面的实验,所以自己不懂的地方很多,感谢楼主。
3楼2018-07-26 16:13:13
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大丸子丹

新虫 (初入文坛)

谢谢分享~好实用
2楼2018-07-20 11:28:59
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全是爱1991

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主你好,我是化学专业的,最近做实验 想把配置的牛血清蛋白BSA的磷酸缓冲液转移到NC膜上,直接滴加的话NC膜不吸收,请问怎么处理可以简单有效的让NC膜吸收BSA溶液呢?我的实验不涉及细胞、电泳实验等等,忘不吝赐教!
4楼2018-08-21 14:17:03
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就叫Bling

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,大神!请问组织提取出来的蛋白和细胞提取出来的蛋白有很大区别吗?我细胞提取出来的蛋白做wb有结果,可是用组织跑出来,wb没有见条带,用考马斯亮蓝染色也不是很明显,感觉没有看到条带?大神有空可以帮忙解答下吗?谢谢!
5楼2018-08-23 17:43:58
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