24小时热门版块排行榜    

查看: 829  |  回复: 2
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

会思考的大鹅

新虫 (初入文坛)

[求助] 已知酶底物,怎么获得这种酶的基因或蛋白序列?

我想要研究一个鸡的酶暂称为A,它在人和鼠和其他物种存在,并且能够查到他们的基因和蛋白的序列,而通过酶底物活性测定确定了鸡体内有能够催化和人的酶A相同底物的这种酶,之前研究也是通过不同物种这个酶基因的保守区设计引物P出一小段基因,但是比对结果与鸡同家族的另一酶B同源性高达90以上,所以很困惑现在P到的这一小段如果就是酶B,那么酶B的底物我不确定是不是和酶A相同啊,也有文献说酶B底物是其他的,
那么我现在有必要用RACE继续扩增他的全长看是不是就是酶B呢?
或者
我可以用人的酶A的抗体调取鸡的同源蛋白做免疫沉淀在测序,和酶B做对比吗?(因为能够代谢该底物的酶在鸡体内没有文献报道它的基因或蛋白序列,我不能买到抗鸡酶A的抗体来研究它。)
还是说想要研究酶A与其它转录因子的调控作用,可以不用抗体,不知道基因序列也可以研究,(因为目前就只知道存在代谢这个底物的酶和一段与别的酶同源很高的基因序列)所以我很困惑,希望有没有大神来解答一下我的疑问,或者有没有好的思路,相似的研究分享一下。谢谢啦@gyesang
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

会思考的大鹅

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Crazy cat at 2018-06-04 12:56:05
建议提取蛋白做ip之后再分析,毕竟你就算全长序列相同,也不一定表达活性完全相同的蛋白

是用人的抗体做IP吗

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-06-05 09:35:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

Crazy cat

铜虫 (小有名气)


建议提取蛋白做ip之后再分析,毕竟你就算全长序列相同,也不一定表达活性完全相同的蛋白

发自小木虫Android客户端
2楼2018-06-04 12:56:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +4 Tide man 2026-08-11 4/200 2026-08-12 00:39 by liuqidi
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +17 Lanmanbaby 2026-08-09 29/1450 2026-08-12 00:24 by zhanghaozhu
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见