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才女变形记

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memorize1991

木虫 (正式写手)



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你说的重组酶是在同源重组方式连接载体和目的片段中用到,这种方式的优点是用时短,不产生缝隙。还有现在用到的Gibson体系也具有同样优点,而且效率比同源重组更高。传统的酶切酶连中,是T4连接酶将载体和目的片段的磷酸二酯键连接起来,这种方式一般用时较长(虽然有快切酶和快连酶),再就是传统酶切酶连再向载体上连接大片段是效率比较低,特别是在载体上更换启动子,终止子等时会比较麻烦。所以我们在蛋白表达时,现在更换了比较省时省力的同源重组方式和Gibson连接方式。这是我做实验的一些浅见

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18楼2018-05-26 23:10:39
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memorize1991

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
19楼: Originally posted by 才女变形记 at 2018-05-29 19:58:05
非常感谢,你说T4连接酶是将磷酸二酯键连接起来,能再问你个问题吗,重组酶是怎么把DNA和载体连接到一起的,它俩有同源序列,它俩是怎么同源重组上的,我很好奇,重组酶是怎么起作用将DNA片段重组到载体上的,非常 ...

你可以看看生物化学和分子生物学,其实就是和有丝分裂中同源染色体分离时发生的交换。遗传学中说到的单交换双交换就是属于同源交换,你可以看看holiday模型,然后看看遗传中的单交换双交换,大概就能理解了。

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21楼2018-05-29 22:56:38
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2018-05-26 22:51  
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