| 查看: 4085 | 回复: 13 | |||||
| 当前主题已经存档。 | |||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||||
[交流]
【求助】透析袋使用
|
|||||
|
突然要使用透析袋，之前没用过，不知道怎么样的，是不是用之前要处理阿，还要带手套，有懂的吗？麻烦给我说说原理和使用方法。我需要准备什么？ [ Last edited by zhangwj on 2009-3-25 at 00:11 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 药物控释 | 高分子聚合方面 |
» 猜你喜欢
有大佬会合成重铬酸铵吗？
已经有1人回复
-
生活不会亏待每一个认真努力的人
已经有0人回复
-
生物力学与组织工程学论文润色/翻译怎么收费?
已经有286人回复
-
把心放稳，生活自会给你答案
已经有0人回复
-
你真正的底气，是悄悄努力的每一天
已经有0人回复
-
求助文章是否已经被EI收录
已经有1人回复
-
斑马鱼孵化求助
已经有0人回复
-
投稿Elsevier的Neoplasia杂志，到最后选publishing options时页面空白，不能完成投稿
已经有22人回复
★ ★
yusen_1982(金币+2,VIP+0):欢迎应助！ 3-25 10:59
yusen_1982(金币+2,VIP+0):欢迎应助！ 3-25 10:59
|
网上查到的一些资料，我身边有人在做透析液的检测的，最好带手套，毕竟是做试验的基本要求吧~ 透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，就叫做透析袋。 自Thomas Graham 1861年发明透析方法至今已有一百多年。透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。 透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。 透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。 透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜，目前常用的是美国Union Carbide （联合碳化物公司）和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管，截留分子量MwCO（即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量，缩写为MwCO）通常为1万左右。 商品透析袋制成管状，其扁平宽度为23 mm～50 mm不等。为防干裂，出厂时都用10％的甘油处理过，并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质，它们对蛋白质和其它生物活性物质有害，用前必须除去。可先用50％乙醇煮沸1小时，再依次用50％乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。实验证明，50％乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中，若长时间不用，可加少量NaN2，以防长菌。洗净凉干的透析袋弯折时易裂口，用时必须仔细检查，不漏时方可重复使用。 新透析袋如不作如上的特殊处理，则可用沸水煮五至十分钟，再用蒸馏水洗净，即可使用。使用时，一端用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用特制的透析袋夹夹紧，由另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液，通常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加50％是正常的。为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用磁子搅拌。透析的容器要大一些，可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析，可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。 检查透析效果的方法是：用1％ BaCl2检查(NH4)2SO4，用1％ AgNO3 检查NaCl、KCl等。 为了提高透析效率，还可以使用各种透析装置。使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。美国生物医学公司（Biomed Instruments Inc.）生产的各种型号的Zeineh 透析器，由于使用对流透析的原理，使透析速度和效率大大提高。 |
3楼2009-03-25 10:54:13
travelerchem
至尊木虫 (知名作家)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 18663.5
- 红花: 3
- 帖子: 5156
- 在线: 285.1小时
- 虫号: 295226
- 注册: 2006-11-11
- 性别: GG
- 专业: 有机分子功能材料化学
2楼2009-03-25 00:10:53
winter_gates
金虫 (正式写手)
生命过客
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1161.8
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 615
- 在线: 20.4小时
- 虫号: 541629
- 注册: 2008-04-08
- 专业: 生物化学
4楼2009-03-25 20:20:46
wuwt
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2786.5
- 散金: 218
- 红花: 1
- 帖子: 743
- 在线: 227.1小时
- 虫号: 585360
- 注册: 2008-08-08
- 性别: GG
- 专业: polymer
5楼2009-03-26 02:09:24