24小时热门版块排行榜    

查看: 321  |  回复: 4
当前主题已经存档。

villyw

金虫 (初入文坛)

[交流] 如何做好真核转染?

RT,请教各位虫友,真核转染(lipofectAmine 2000)应该怎样才能做好呢?需要哪些注意事项呢?希望有此经验的虫友不吝赐教,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicknelson

至尊木虫 (职业作家)

按说明书操作就行了啊,说明书一定要看仔细,有几点要注意的。别的也没什么问题。
2楼2009-03-25 22:01:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米见方ggsddu

金虫 (小有名气)

only屋里哇啦

看说明书,另外注意细胞密度,和均匀程度,用枪加入培养基或混合后的复合物时,慢速滴加
再就是操作小心不要染菌就不用多说了
低调潜行
3楼2009-03-28 23:46:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

转RNA时细胞密度一般为50%
做一个小正交
10nM
30nM
50nM
的siRNA
以及减50%转染试剂,推荐浓度转染试剂,增50%转染试剂

可以不需要完全做很多正交,随机挑五六个出来做
但一般是,低剂量的siRNA搭配低剂量的转染试剂

48h后收蛋白跑下western看看
4楼2009-03-29 00:05:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mofatuzi

新虫 (小有名气)

DNA不能加太多,否则细胞过量表达,易死
5楼2009-03-29 22:06:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 villyw 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +8 Auroracx 2026-03-22 8/400 2026-03-26 19:55 by 不吃魚的貓
[考研] 0703化学338求调剂! +4 Zuhui0306 2026-03-26 4/200 2026-03-26 19:07 by macy2011
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +9 holy J 2026-03-21 9/450 2026-03-26 15:47 by 161765490
[考研] 材料277求调剂 +5 min3 2026-03-24 5/250 2026-03-26 15:13 by zzll406
[考研] 打过很多竞赛,085406控制工程300分,求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 308求调剂 +5 墨墨漠 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:19 by 544594351
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 一志愿南大,0703化学,分数336,求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见