应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 超声波破碎
51/1返回列表
查看: 1142  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Allon857

新虫 (初入文坛)

[求助] 超声波破碎 已有2人参与

一升菌液得到3克菌体，破碎后纯化上清，菌体应该用多少缓冲液(我用的后面纯化用的binding buffer)溶解比较好？超声破碎应该是有一定浓度条件的，最近实验室总是破不清，不知道该用多少浓度，希望各位大神解答，谢谢！

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-05-25 17:13:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

863828916

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
10倍够了，也就是30ml。超声不一定能够破清吧?
赞一下 回复此楼
2楼2018-05-25 17:27:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Allon857

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 863828916 at 2018-05-25 17:27:15
10倍够了，也就是30ml。超声不一定能够破清吧?

哦哦，感觉稀了能破清，但是不利于下一步的纯化。另外破碎的时候破碎效率什么的参数能否告知一下？谢谢！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2018-05-25 17:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

863828916

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Allon857 at 2018-05-25 17:59:53
哦哦，感觉稀了能破清，但是不利于下一步的纯化。另外破碎的时候破碎效率什么的参数能否告知一下？谢谢！
...

稀释10-15倍肯定足够了，稀了没什么卵用，只要别太粘稠即可。
若30ml左右的话，300w-400w即可。每次超声3s，间隔6-7s，一轮时长3min，总共超3-4轮即可。
超声要将样品管放在冰水混合物中，主要是别温度高了蛋白失活。
赞一下 回复此楼
4楼2018-05-25 18:10:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

汀语言

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

什么菌啊？如果有细胞壁要加溶菌酶或溶壁酶。如果是大肠杆菌，振幅20%，超声20min，超3s,停3s够了。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2018-05-31 17:51:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Allon857 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭