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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 分类/鉴定 » 大肠杆菌SEM制样
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King-白砂糖

新虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌SEM制样已有2人参与

最近一直在用SEM拍大肠杆菌的形态，先用戊二醛的PBS溶液固定，在用乙醇脱水，冷冻干燥，喷金。最后拍出来的细菌表面塌陷，不光滑饱满。重复多次都是这样的情况，不知道是什么原因导致的。希望有经验的高手能够帮助我解决这一问题，在下感激不尽。

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1楼2018-05-25 10:52:53
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by King-白砂糖 at 2018-06-14 15:21:48
请问你是放在什么东西上风干的？硅片还是玻璃容器里？
...

我就放在超净台里面风干的
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8楼2018-06-15 08:47:02
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haifeng918

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
考虑以下几个方面：1.戊二醛的浓度有可能过高，过高容易塌陷，过低容易固定不好；2.在固定之后，脱水之前要用蒸馏水冲洗干净残留的戊二醛；3.在酒精梯度脱水之后，用叔丁醇置换酒精三次。大肠杆菌外壳较硬，还是比较好制样的。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

King-白砂糖
低维功能性材料，材料表征技术研究，样品制备方法优化设计。
2楼2018-05-25 16:41:18
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King-白砂糖

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by haifeng918 at 2018-05-25 16:41:18
考虑以下几个方面：1.戊二醛的浓度有可能过高，过高容易塌陷，过低容易固定不好；2.在固定之后，脱水之前要用蒸馏水冲洗干净残留的戊二醛；3.在酒精梯度脱水之后，用叔丁醇置换酒精三次。大肠杆菌外壳较硬，还是比较 ...

感谢感谢，我再试试。

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3楼2018-05-27 09:07:44
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hzh1258

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by King-白砂糖 at 2018-05-27 09:07:44
感谢感谢，我再试试。
...

楼主，现在效果怎么样？我也想用sem去观察一下大肠杆菌
赞一下 回复此楼
4楼2018-06-13 17:17:16
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查看全部 14 个回答
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