24小时热门版块排行榜    

查看: 603  |  回复: 7
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

x8q4h11

木虫 (小有名气)

[交流] PCR问题,急!!!

各位虫友,大家好。想请教一下PCR时的退火温度如何选择,谢谢。我用的试剂盒上写的是要比引物的熔化温度(变性温度)低10度左右,可是两条引物的变性温度是不同的,该以哪条引物为基准呢?

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-7 at 20:24 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

崔红利

新虫 (正式写手)

退火温度一般情况下是需要自己去摸索,一般情况下是Tm值减五,最好是开始就做个温度梯度的PCR   这样会浪费试剂,不过是最高效的.仅供参考!
8楼2009-03-25 09:43:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

TM值加减5度或者10度
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-03-25 05:24:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子

影响不是特别大。如果不确定就选低的吧
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
4楼2009-03-25 05:49:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欣晴5832

金虫 (小有名气)

我觉得这要看你做什么了,要是多态性的话就低一点,扩特异性带的话就不要太低
5楼2009-03-25 08:44:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见