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x8q4h11木虫 (小有名气)
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[交流]
PCR问题，急！！！
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各位虫友，大家好。想请教一下PCR时的退火温度如何选择，谢谢。我用的试剂盒上写的是要比引物的熔化温度（变性温度）低10度左右，可是两条引物的变性温度是不同的，该以哪条引物为基准呢？ [ Last edited by 350784478 on 2009-10-7 at 20:24 ] |
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退火温度一般情况下是需要自己去摸索，一般情况下是Tm值减五，最好是开始就做个温度梯度的PCR 这样会浪费试剂，不过是最高效的.仅供参考！ 
8楼2009-03-25 09:43:45
sutao1979
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