24小时热门版块排行榜

返回列表

zxldbnydx

金虫 (小有名气)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 590.4
散金: 36
红花: 3
帖子: 215
在线: 46.3小时
虫号: 3747700
注册: 2015-03-18
性别: GG
专业: 生物化学

[交流] 疏水层析样品电导已有2人参与

疏水层析，高盐吸附，低盐洗脱。
在一定范围内，盐浓度越高，样品与疏水基团结合越强。
用饱和硫酸铵调节样品电导，目的蛋白不会因为盐浓度过高而聚集么？
上样前需要过滤/离心么？如果过滤会导致聚集的蛋白被膜拦截么？
原液SDS-PAGE电泳，目的条带很浓，调完电导后的样品电泳，目的条带很淡，原因是什么，聚集沉淀，分布不均一，取上层溶液电泳？

发自小木虫Android客户端

回复此楼

» 猜你喜欢

只有拼出来的美丽，没有等出来的辉煌！

1楼 2018-05-23 23:04:11

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

专家经验: +702
BioEPI: 1
应助: 517 (博士)
金币: 467.7
散金: 18028
红花: 313
帖子: 3594
在线: 518.9小时
虫号: 4027804
注册: 2015-08-18
性别: GG
专业: 核技术及其应用
管辖: 生物科学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

1.硫酸铵盐析的，硫酸铵是蛋白沉淀下来的浓度远远比疏水层析上样的浓度高出很多，疏水一般1-1.5M，而盐析时要6M以上。所以疏水层析里面加的盐不会是蛋白沉淀。
2.上样前当然要过滤，把固形物去除。过滤不是超滤，蛋白不会聚集。
3，盐的存在会影响电泳过程。

赞一下(1人)

回复此楼

2楼2018-05-24 09:11:09

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zxldbnydx

金虫 (小有名气)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 590.4
散金: 36
红花: 3
帖子: 215
在线: 46.3小时
虫号: 3747700
注册: 2015-03-18
性别: GG
专业: 生物化学

引用回帖:

2楼: Originally posted by hc-material at 2018-05-24 09:11:09
1.硫酸铵盐析的，硫酸铵是蛋白沉淀下来的浓度远远比疏水层析上样的浓度高出很多，疏水一般1-1.5M，而盐析时要6M以上。所以疏水层析里面加的盐不会是蛋白沉淀。
2.上样前当然要过滤，把固形物去除。过滤不是超滤，蛋 ...

也就是说我的高盐样品中目的蛋白条带与原液相比，灰度较低，原因是高盐影响电泳么？

发自小木虫Android客户端

赞一下

回复此楼

只有拼出来的美丽，没有等出来的辉煌！

3楼2018-05-24 10:50:51

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖