24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3249  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

无金易主

新虫 (小有名气)

[交流] 关于CRISPR Cas9同源重组敲除基因验证p出来两条带

关于CRISPR Cas9同源重组敲除大肠杆菌BL21基因验证p出来两条带,一条野生型大小条带,一条同源臂大小条带,请问大家做Red同源重组敲除或者crispr类似敲除基因的时候遇见过这个情况吗?你们都是怎么解决的呢,求好人指点

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiatingxue

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
兄弟,请问这个问题怎么解决了,谢谢
骐骥一跃,不能十步;驽马十驾,功在不舍
9楼2022-07-08 22:03:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-21 07:57:23
估计就是重组和未重组混杂一起了
那就筛克隆好了,用单克隆一个个来做PCR鉴定,肯定能够挑出来
2楼2018-05-20 03:03:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无金易主

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by soarrow at 2018-05-20 03:03:09
估计就是重组和未重组混杂一起了
那就筛克隆好了,用单克隆一个个来做PCR鉴定,肯定能够挑出来

挑的单菌落,确定没杂菌

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-05-20 22:25:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
那就奇怪了。重组片段你是用质粒还是线性DNA?
如果是质粒的话,有没有可能是没有发生重组,而质粒存在于菌体,所以扩增时候有两条带!?
可以考虑换对引物,用比同源臂上下游范围更大一点的位置,确认有没有真正重组发生。
4楼2018-05-22 01:11:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工调剂 +10 kikiki7 2026-03-30 10/500 2026-03-30 21:37 by lixiang110
[考研] 11408总分309,一志愿东南大学求调剂,不挑专业 +5 天赋带到THU 2026-03-29 6/300 2026-03-30 20:49 by dick_runner
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +12 辰沐5211314 2026-03-26 12/600 2026-03-30 19:28 by Wang200018
[考研] 化学0703 调剂 306分 一志愿211 +8 26要上岸 2026-03-28 8/400 2026-03-30 16:39 by herarysara
[考研] 材料科学与工程调剂 +8 深V宿舍吧 2026-03-30 8/400 2026-03-30 16:19 by 晶体之美
[考研] 求调剂 +7 研研,接电话 2026-03-24 8/400 2026-03-30 14:14 by 白云朵朵飞
[考研] 348求调剂 +6 小懒虫不懒了 2026-03-28 6/300 2026-03-30 10:29 by Evan_Liu
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +6 niko- 2026-03-27 6/300 2026-03-30 10:25 by herarysara
[考研] 375求调剂 +6 雨夏整夜 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:21 by herarysara
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研经历 +8 cccchenso 2026-03-29 8/400 2026-03-29 23:53 by 我是小康
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 320分,材料与化工专业,求调剂 +9 一定上岸aaa 2026-03-27 13/650 2026-03-28 15:00 by 神马都不懂
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 0703化学求调剂,各位老师看看我!!! +5 祁祺祺 2026-03-25 5/250 2026-03-27 21:44 by 东方猪猪
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
信息提示
请填处理意见