应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 关于CRISPR Cas9同源重组敲除基因验证p出来两条带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3253  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

无金易主

新虫 (小有名气)

[交流] 关于CRISPR Cas9同源重组敲除基因验证p出来两条带

关于CRISPR Cas9同源重组敲除大肠杆菌BL21基因验证p出来两条带，一条野生型大小条带，一条同源臂大小条带，请问大家做Red同源重组敲除或者crispr类似敲除基因的时候遇见过这个情况吗？你们都是怎么解决的呢，求好人指点

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-05-19 23:13:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

FYH2015

捐助贵宾 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
哥们 敲得咋样了？貌似BL21比K12什么的难敲呀
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2020-05-18 19:11:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-21 07:57:23
估计就是重组和未重组混杂一起了
那就筛克隆好了，用单克隆一个个来做PCR鉴定，肯定能够挑出来
赞一下 回复此楼
2楼2018-05-20 03:03:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无金易主

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by soarrow at 2018-05-20 03:03:09
估计就是重组和未重组混杂一起了
那就筛克隆好了，用单克隆一个个来做PCR鉴定，肯定能够挑出来

挑的单菌落，确定没杂菌

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2018-05-20 22:25:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
那就奇怪了。重组片段你是用质粒还是线性DNA？
如果是质粒的话，有没有可能是没有发生重组，而质粒存在于菌体，所以扩增时候有两条带！？
可以考虑换对引物，用比同源臂上下游范围更大一点的位置，确认有没有真正重组发生。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2018-05-22 01:11:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 307求调剂 +18 超级伊昂大王 2026-03-24 20/1000 2026-03-31 01:16 by BruceLiu320
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +5 小张zxy张 2026-03-26 10/500 2026-03-31 00:29 by jp9609
[考研] 本科211总分289，08工学真心求调剂 +3 utopiaE 2026-03-30 3/150 2026-03-30 23:42 by ms629
[考研] 调剂 +4 GK72 2026-03-30 4/200 2026-03-30 20:32 by dick_runner
[有机交流] 考研调剂 +8 watb 2026-03-26 8/400 2026-03-30 18:40 by 544594351
[考研] 329求调剂，一志愿西北工业大学，材料工程（085601） +5 小小机灵虫 2026-03-29 11/550 2026-03-30 15:02 by Wang200018
[考研] 考研调剂 +5 Sanmu-124 2026-03-26 5/250 2026-03-30 13:36 by chemdavid
[考研] 332求调剂 +6 Lyy930824@ 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:53 by 1172367218
[考研] 材料与化工272求调剂 +21 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 21/1050 2026-03-30 10:52 by 晴空210210
[考研] 311求调剂 +10 lin0039 2026-03-26 10/500 2026-03-30 10:26 by herarysara
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 071000生物学求调剂，初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 一志愿华理，数一英一285求A区调剂 +8 AZMK 2026-03-25 12/600 2026-03-28 18:15 by AZMK
[考研] 本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭