24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2090  |  回复: 11

yuevis

铜虫 (小有名气)

[交流] 急问!芽孢杆菌同源重组的相关问题已有3人参与

我做多黏芽孢杆菌同源重组敲除的实验,总是没有重组子,怀疑是不是同源臂设置的短了,请问做芽孢杆菌同源敲除一般同源臂多长可以啊?我的实验左臂470多bp,右臂510bp,可以吗?

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)


2楼2018-05-18 14:58:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuevis

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2018-05-18 14:58:55
转化方法有问题

希望可以详细解答,同源臂-长度没问题是吗?转化多次试过spizizen转化法,,以及一次电转化,都么有结果。

发自小木虫Android客户端
3楼2018-05-18 15:24:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

young1983

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Paenibacillus同源重组一般用500bp同源臂,前提是较高的转化效率。如需帮助可以联系。

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-05-18 15:44:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuevis

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by young1983 at 2018-05-18 15:44:02
Paenibacillus同源重组一般用500bp同源臂,前提是较高的转化效率。如需帮助可以联系。

一般都是500bp,会不会太短?有人和我说要在1000bp左右,甚至更长。在问一下,同源臂长短和敲除的片段长度有关吗

发自小木虫Android客户端
5楼2018-05-18 16:18:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

young1983

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们一般用500bp,当然同源臂越长越有利于重组,但与目的基因长度关系不大。

发自小木虫IOS客户端
6楼2018-05-18 16:22:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuevis

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by young1983 at 2018-05-18 16:22:52
我们一般用500bp,当然同源臂越长越有利于重组,但与目的基因长度关系不大。

那请问你们一般转化用什么方法?,重组效率大概多少?

发自小木虫Android客户端
7楼2018-05-18 16:52:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

young1983

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by yuevis at 2018-05-18 16:52:21
那请问你们一般转化用什么方法?,重组效率大概多少?
...

电转,效率约10的8次方每微克DNA

发自小木虫IOS客户端
8楼2018-05-18 18:42:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuevis

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by young1983 at 2018-05-18 18:42:54
电转,效率约10的8次方每微克DNA
...

不知道能否告知您的转化方法?

发自小木虫Android客户端
9楼2018-05-18 18:46:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

young1983

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by yuevis at 2018-05-18 18:46:25
不知道能否告知您的转化方法?
...

可以帮忙转化

发自小木虫IOS客户端
10楼2018-05-18 18:55:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuevis 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见