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元夜

新虫 (初入文坛)

[求助] 连续两个星期摇菌摇不起来,求助

做蛋白质纯化,连续两个星期摇菌摇不起来菌,我们实验室用的是BL21和Rossetta~刚开始做转化,转化出来的平板挑斑摇不起来,后来终于挑斑摇起来一次,送去测序成功了~~之后一个星期接小试管只摇起来一次

刚开始一个星期,摇不起来菌有的是被噬菌体吃了,能看到摇浑之后又变清,小试管里有碎片。后来紫外和酒精以及84交叉处理后,没有见到噬菌体

但是转化质粒的的平板挑斑斑和刚保的种就是摇不起来~好不容易能摇起来一支,接大瓶又会摇清

备注:可以肯定抗性没有加错,都是在超净台酒精灯旁边操作的,找不到原因,也找不到改进的方法
一起摇菌的同学的菌就挺好的

有人能告知什么怎么能挺高摇菌的成功率吗?

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woshishui916

木虫 (著名写手)


drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-07-03 01:01:52
培养了多长时间,是不是时间不够呢?温度?如果怀疑有噬菌体,可以换个环境培养

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2楼2018-05-11 14:05:42
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元夜

新虫 (初入文坛)

谢谢回复,不明白为啥,这两周又好了

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3楼2018-05-19 19:22:59
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Allub

铁虫 (正式写手)

楼主想问一下你污染的噬菌体原液还有么

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茄言茄语bot
4楼2018-07-02 13:06:05
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