| 查看: 1365 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
草哥cium新虫 (正式写手)
|
[求助]
高保真酶TA克隆
|
|
|
大神们，我把高保真酶的dna产物切胶纯化了，取了5ul 再加了5ul普通tap酶，72度10分钟，拿出来直接连接T载行不行呀。。。现在看上去都是绿色的连接产物。。 第一次做求解呀。。 @biostar2009 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有186人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
草哥cium
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1066.6
- 散金: 66
- 帖子: 461
- 在线: 13.1小时
- 虫号: 7852302
- 注册: 2018-01-30
- 专业: 兽医寄生虫学
5楼2018-05-10 07:55:26
渊博震天
版主 (职业作家)
Yeast Display
- MolEPI: 7
- 应助: 212 (大学生)
- 贵宾: 0.043
- 金币: 22006.2
- 散金: 257
- 红花: 55
- 沙发: 1
- 帖子: 4581
- 在线: 688.8小时
- 虫号: 2380836
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 抗体工程学
- 管辖: 分子生物
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-05-10 07:55:31
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-05-10 07:55:31
|
我没这样做过，我做的都是切胶回收之后加同体积普通taq酶72℃延伸10min，之后用pcr产物纯化试剂盒纯化后根据合理体系进行TA克隆。你的5ul连接产物浓度怎么样？有没有跑个胶看看，如果浓度低也不好连。 不知道可不可以直接拿加尾液直接连的，等等做过的前辈来回答吧。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2018-05-09 22:36:18
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2018-05-09 22:56:45
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-10 07:55:44
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-10 07:55:44
|
Taq酶加buffer没，按照正常反应比例加上镁离子和dNTP，72度反应30分钟，产物直接连T载体 发自小木虫Android客户端 |
4楼2018-05-10 02:10:24