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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 如何将大的基因簇片段异源表达
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yuevis

铜虫 (小有名气)

[求助] 如何将大的基因簇片段异源表达

通过全基因组测序，了解到有一个抗生素合成的基因簇接近40kb,想把这段基因异源表达到酵母或大肠里，请问应该怎么做？看文献里有用建立基因组文库的方法，可以详细解释一下吗？
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1楼 2018-05-04 15:33:54
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匿名

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2楼2018-05-06 00:28:12
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yuevis

铜虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by Limbo11 at 2018-05-06 00:28:12
楼主基因簇是哪个菌来源的？

芽孢杆菌

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3楼2018-05-06 08:07:23
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匿名

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-06 09:52:17
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4楼2018-05-06 09:49:26
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yuevis

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Limbo11 at 2018-05-06 09:49:26
只了解大肠杆菌，也是听别人说的，随机酶切基因组DNA，回收片段，去磷酸化，载体包裹，然后侵入大肠杆菌，后面就是筛了。直接原始菌株里面做不行吗？为什么要异源

这个菌不太容易导入质粒，想在外源做

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5楼2018-05-06 10:17:13
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yuevis

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Limbo11 at 2018-05-06 09:49:26
只了解大肠杆菌，也是听别人说的，随机酶切基因组DNA，回收片段，去磷酸化，载体包裹，然后侵入大肠杆菌，后面就是筛了。直接原始菌株里面做不行吗？为什么要异源

您的方法是建立文库吗，我看有用次时代也有用fosmid的，这些不懂，还请指教。

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6楼2018-05-06 10:18:25
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