| 查看: 1016 | 回复: 2 | ||
[求助]
为什么双酶切后测序找不到上游酶切位点？ 已有1人参与
|
|
上游起始密码子前5端加入了BamH1的酶切位点，做了菌落PCR后，强阳性，pcr产物测序结果找orf后做blastp，和预期片段比对率98%，目的片段应该是加上去了。但是，一代测序的结果中找不到酶切位点，更没有酶切位点上游的序列，整个序列可以找到atg但感觉不是原来的起始密码子。下游酶切位点及后面序列都没问题。载体用的是pet-32a原核表达载体，下游有酶切位点，后面就是载体序列。 分析可能：酶的特异性不佳，有星活力。还有别的原因吗？求助，谢谢大神们了～～ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有108人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-04 07:55:42
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-04 07:55:42
|
本帖内容被屏蔽 |
2楼2018-05-03 17:54:10
GRUBBY_WU
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 153 (高中生)
- 金币: 6551.9
- 红花: 24
- 帖子: 1233
- 在线: 154小时
- 虫号: 7859436
- 注册: 2018-02-01
- 性别: GG
- 专业: 人类遗传学
3楼2018-05-03 21:19:57
20