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tutufei

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助 细胞破碎方法

求跑SDS-PAGE前,大肠杆菌的细胞破碎方法及优缺点

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-6 at 20:08 ]
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zl382

铁虫 (小有名气)


350784478(金币+1,VIP+0):感谢参与 10-6 20:08
超声波破碎就可以了。
后退,绝对是无路可走!
2楼2009-03-21 13:14:54
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sunbinice

银虫 (初入文坛)


350784478(金币+1,VIP+0):感谢参与 10-6 20:08
超声破碎,加点蛋白抑制剂
3楼2009-03-21 20:38:48
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飞侠8683

新虫 (小有名气)


350784478(金币+1,VIP+0):感谢参与 10-6 20:09
加溶菌酶或超声波破碎
4楼2009-03-22 00:11:10
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黑罕

金虫 (小有名气)

小样
加loading buffer 煮个15分钟,离心取上清上样
5楼2009-03-22 08:46:52
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0704002

铁虫 (初入文坛)

超声破碎效果会好些,我现在用的就是超声破碎
6楼2009-03-22 09:12:33
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by 黑罕 at 2009-3-22 08:46:
小样
加loading buffer 煮个15分钟,离心取上清上样

我以前也是用的这个,说超声波的都有点不大靠谱,煮10分钟就可以了,loading buffer加多少你跑两次看一下结果就知道了,这样做的样品还有一个好处就是能放很久,我在-20度里放了一年拿出来和新做的对照跑了一下没有什么两样
7楼2009-03-22 13:07:31
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by 黑罕 at 2009-3-22 08:46:
小样
加loading buffer 煮个15分钟,离心取上清上样

我以前也是用的这个,说超声波的都有点不大靠谱,煮10分钟就可以了,loading buffer加多少你跑两次看一下结果就知道了,这样做的样品还有一个好处就是能放很久,我在-20度里放了一年拿出来和新做的对照跑了一下没有什么两样
8楼2009-03-22 13:08:09
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

楼上,为什么不靠谱?难不成大家做实验做出来的结果都是假的?分子克隆是瞎说的?
不否认加loading buffer煮可以做出来,但是超声不靠谱就怪了。呵呵

[ Last edited by winter_gates on 2009-3-22 at 14:46 ]
For my life!
9楼2009-03-22 14:44:38
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200448506

金虫 (小有名气)

超声破碎挺好用啊
10楼2009-03-22 16:30:07
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