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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助 细胞破碎方法
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tutufei

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助 细胞破碎方法

求跑SDS-PAGE前，大肠杆菌的细胞破碎方法及优缺点

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-6 at 20:08 ]
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1楼 2009-03-21 13:10:57
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zl382

铁虫 (小有名气)
★
350784478(金币+1,VIP+0):感谢参与 10-6 20:08
超声波破碎就可以了。
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后退，绝对是无路可走！
2楼2009-03-21 13:14:54
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sunbinice

银虫 (初入文坛)
★
350784478(金币+1,VIP+0):感谢参与 10-6 20:08
超声破碎，加点蛋白抑制剂
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3楼2009-03-21 20:38:48
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飞侠8683

新虫 (小有名气)
★
350784478(金币+1,VIP+0):感谢参与 10-6 20:09
加溶菌酶或超声波破碎
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4楼2009-03-22 00:11:10
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黑罕

金虫 (小有名气)
小样
加loading buffer 煮个15分钟,离心取上清上样
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5楼2009-03-22 08:46:52
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0704002

铁虫 (初入文坛)
超声破碎效果会好些，我现在用的就是超声破碎
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6楼2009-03-22 09:12:33
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by 黑罕 at 2009-3-22 08:46:
小样
加loading buffer 煮个15分钟,离心取上清上样

我以前也是用的这个，说超声波的都有点不大靠谱，煮10分钟就可以了，loading buffer加多少你跑两次看一下结果就知道了，这样做的样品还有一个好处就是能放很久，我在-20度里放了一年拿出来和新做的对照跑了一下没有什么两样
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7楼2009-03-22 13:07:31
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by 黑罕 at 2009-3-22 08:46:
小样
加loading buffer 煮个15分钟,离心取上清上样

我以前也是用的这个，说超声波的都有点不大靠谱，煮10分钟就可以了，loading buffer加多少你跑两次看一下结果就知道了，这样做的样品还有一个好处就是能放很久，我在-20度里放了一年拿出来和新做的对照跑了一下没有什么两样
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8楼2009-03-22 13:08:09
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
楼上，为什么不靠谱？难不成大家做实验做出来的结果都是假的？分子克隆是瞎说的？
不否认加loading buffer煮可以做出来，但是超声不靠谱就怪了。呵呵

[ Last edited by winter_gates on 2009-3-22 at 14:46 ]
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For my life！
9楼2009-03-22 14:44:38
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200448506

金虫 (小有名气)
超声破碎挺好用啊
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10楼2009-03-22 16:30:07
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