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kailb

新虫 (初入文坛)

[求助] 你好!我想问一下我在对质粒进行双酶切的过程中,除了出现了我预... 已有1人参与

你好!我想问一下我在对质粒进行双酶切的过程中,除了出现了我预想的三条带外,还出现了一条非相关带,的原因是什么? @biostar2009

@youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
嗯 质粒双酶切最差的预想情况不是四条带吗?
2楼2018-04-26 01:36:20
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snhajn

新虫 (著名写手)

为啥是三条带,正常不是两条带吗?

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3楼2018-04-26 07:16:56
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kailb

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fjtony163 at 2018-04-26 01:36:20
嗯 质粒双酶切最差的预想情况不是四条带吗?

有一个酶有两个酶切位点,另外一个酶在再切开的两个片段中再切割一次,本来应该形成三条带,但是现在出现4条带,而且另外三条带是我预期想要的,就是多出了第四条带,是因为什么原因?

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4楼2018-04-26 13:13:02
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fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

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引用回帖:
4楼: Originally posted by kailb at 2018-04-26 13:13:02
有一个酶有两个酶切位点,另外一个酶在再切开的两个片段中再切割一次,本来应该形成三条带,但是现在出现4条带,而且另外三条带是我预期想要的,就是多出了第四条带,是因为什么原因?
...

双酶切的预期不应该是:1,完全没切开(超螺旋结构 一条比实际全长度短一点的带)2, 只有一个酶切开了(线性化 等于全长)3,双酶切都切到了 (两条带) 这三种情况基本同时出现是很正常的 这不就是四条带吗

另外你如果时间跑长了 还有可能会非特异性酶切 那就不知道会有几条带了
5楼2018-04-27 07:47:10
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fjtony163

版主 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by kailb at 2018-04-26 13:13:02
有一个酶有两个酶切位点,另外一个酶在再切开的两个片段中再切割一次,本来应该形成三条带,但是现在出现4条带,而且另外三条带是我预期想要的,就是多出了第四条带,是因为什么原因?
...

再来说你这种情况 你在想的是“所有酶没有非特异性切 而且所有酶百分百切开 没有没切的” 那就是三条带 但如我上面所说 非特异性酶切 非完整切开 都会有第四五六条带出现
6楼2018-04-27 07:49:05
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kailb

新虫 (初入文坛)

那我的这个酶切检测算正常的吗,是得到了结果吗? @biostar2009

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7楼2018-04-27 13:09:02
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kailb

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by fjtony163 at 2018-04-27 07:49:05
再来说你这种情况 你在想的是“所有酶没有非特异性切 而且所有酶百分百切开 没有没切的” 那就是三条带 但如我上面所说 非特异性酶切 非完整切开 都会有第四五六条带出现...

那我这酶切结果算正常的吗?是得到了结果吗?

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8楼2018-04-27 13:10:49
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fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

引用回帖:
8楼: Originally posted by kailb at 2018-04-27 13:10:49
那我这酶切结果算正常的吗?是得到了结果吗?
...

要看你的带的大小对不对 有没有出现你预计的大小

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

9楼2018-04-27 16:05:55
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kailb

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by fjtony163 at 2018-04-27 16:05:55
要看你的带的大小对不对 有没有出现你预计的大小...

谢谢啦!

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10楼2018-04-28 20:25:55
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