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04swlcm

金虫 (小有名气)


[交流] 质粒提取问题,急!

我用TaKara的普通质粒提取试剂盒提取巨大芽孢杆菌的质粒(pHIS1525),提了好几次都没有跑出条带,是没条带!
我想请教大家一下原因???帮我提提意见!!!万分感谢!本人刚接触分子,感到很陌生,质粒没提出来,无法进行下一步实验,希望大家能帮帮我!
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森林7631

铜虫 (小有名气)

,今天刚和你一起做了,我以为我们会成功呢,但加溶菌酶后没有水浴,哈哈,下次肯定能成功,哈哈
Time lost can not be recalled.
6楼2009-03-20 22:19:30
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月月大可

木虫 (著名写手)

说的详细些,这样大家好帮助你。按说试剂盒提应该比较好提。
使用了几毫升菌液?这个质粒我不太清楚,是严紧型还是松弛型?
2楼2009-03-20 19:12:39
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h8872410kong

金虫 (小有名气)

不要急着做实验,先看看文献,和你做相似东西的别人怎么做的,理解了再动手,就算再遇到提问也会比较有针对性,太泛了不好回答,因为原因太多了
3楼2009-03-20 19:25:54
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04swlcm

金虫 (小有名气)


回复: 月月大可

我提到3mL菌液
操作步骤按试剂盒进行,我用试剂盒提过大肠杆菌的质粒,效果不错
但提巨大芽孢杆菌就不好使,不知道是不是芽孢杆菌不好提质粒?需要加溶菌酶吗?
谢谢你们帮助
4楼2009-03-20 20:11:44
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