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立早

新虫 (小有名气)

[求助] 小分子抗体 已有1人参与

各位大佬,小女子最近做小分子抗体遇到了一些问题,想请教一下各位。小分子本身是没有免疫原性的,所以偶联了载体蛋白,四免测效价时发现血清中的抗体可以和偶联另外一个载体蛋白包被的抗原反应,且效价很高40万左右,而不能与该小分子标记的PCR产物反应。PCR扩增以及PCR产物包板这些步骤每步都设有检测,都证明PCR扩增成功及包板成功,可是后面加入抗血清和二抗后没有反应。想请问一下这种情况问题到底出在哪里?重复几遍了,都是这样。还请各位大佬们指点指点,

@hc-material @gyesang 发自小木虫Android客户端
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立早

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-04-24 05:19:28
那跟你免疫藕连的载体蛋白不反应吗?血清属于多抗,肯定会跟你的载体蛋白有反应的,如果没有建议从藕连开始查找,藕连有没有成功。小分子抗体可能还会跟偶连方式有关,识别位点不同。
...

偶联用于免疫的是BSA也用血清检测了有40万左右,我包板用的是用KLH偶联的,所以不会与载体蛋白有交叉反应,这个效价是20万左右,所以我的抗体能识别我的小分子,但是不能识别标记在核酸上的。

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4楼2018-04-24 08:47:34
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查看全部 8 个回答

bsese

至尊木虫 (文坛精英)

祝好!!祝好运连连!!

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山顶拟诗 歌得吧贺
2楼2018-04-23 14:37:50
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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

那跟你免疫藕连的载体蛋白不反应吗?血清属于多抗,肯定会跟你的载体蛋白有反应的,如果没有建议从藕连开始查找,藕连有没有成功。小分子抗体可能还会跟偶连方式有关,识别位点不同。

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3楼2018-04-24 05:19:28
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成熟质

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

5楼2018-04-24 10:57:30
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