24小时热门版块排行榜    

查看: 1531  |  回复: 7

立早

新虫 (小有名气)

[求助] 小分子抗体 已有1人参与

各位大佬,小女子最近做小分子抗体遇到了一些问题,想请教一下各位。小分子本身是没有免疫原性的,所以偶联了载体蛋白,四免测效价时发现血清中的抗体可以和偶联另外一个载体蛋白包被的抗原反应,且效价很高40万左右,而不能与该小分子标记的PCR产物反应。PCR扩增以及PCR产物包板这些步骤每步都设有检测,都证明PCR扩增成功及包板成功,可是后面加入抗血清和二抗后没有反应。想请问一下这种情况问题到底出在哪里?重复几遍了,都是这样。还请各位大佬们指点指点,

@hc-material @gyesang 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bsese

至尊木虫 (文坛精英)

祝好!!祝好运连连!!

发自小木虫Android客户端
山顶拟诗 歌得吧贺
2楼2018-04-23 14:37:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

那跟你免疫藕连的载体蛋白不反应吗?血清属于多抗,肯定会跟你的载体蛋白有反应的,如果没有建议从藕连开始查找,藕连有没有成功。小分子抗体可能还会跟偶连方式有关,识别位点不同。

发自小木虫Android客户端
3楼2018-04-24 05:19:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

立早

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-04-24 05:19:28
那跟你免疫藕连的载体蛋白不反应吗?血清属于多抗,肯定会跟你的载体蛋白有反应的,如果没有建议从藕连开始查找,藕连有没有成功。小分子抗体可能还会跟偶连方式有关,识别位点不同。
...

偶联用于免疫的是BSA也用血清检测了有40万左右,我包板用的是用KLH偶联的,所以不会与载体蛋白有交叉反应,这个效价是20万左右,所以我的抗体能识别我的小分子,但是不能识别标记在核酸上的。

发自小木虫Android客户端
4楼2018-04-24 08:47:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

成熟质

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

5楼2018-04-24 10:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

立早

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 成熟质 at 2018-04-24 10:57:30
虽然目前只有大专学历,多次考研未果,无职称资格或职位聘用,但建议调整载体蛋白或者查看是否抗原反应是否影响了小分子活性浓度或活能。此外,有些抗原反应某些情况下可能产生特定物质,如:酶或信号传递分子蛋白等 ...

不知道,到核算标记的用商业化的抗体就没问题,自己制备的就不反应,难过。谢谢你的建议

发自小木虫Android客户端
6楼2018-04-24 14:02:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

成熟质

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

7楼2018-04-24 21:07:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝日星空

新虫 (小有名气)

你用的什么方法标记的BSA啊?

发自小木虫IOS客户端
8楼2018-07-19 20:41:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 立早 的主题更新
信息提示
请填处理意见