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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 内参很淡
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虫子739

铁虫 (小有名气)

[交流] 内参很淡

请问高手，为什么我的RT-PCR后的内参条带很淡？PCR循环为35次，上下游引物各为0.5ul（浓度为20uM)，Tm为52和55时条带都很淡。我用的是tubulin和18s。除了可能是引物不合适，还有其它原因吗？
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1楼 2009-03-20 12:26:17
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虫子739

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by winnie1378 at 2009-3-20 13:32:
试试再摸个合适的Tm吧

谢谢回复！在引物TM以下的三个温度都试了，结果都那样。
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3楼2009-03-23 11:36:08
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winnie1378

铁虫 (初入文坛)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖 3-23 12:19
试试再摸个合适的Tm吧
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2009-03-20 13:32:04
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sail000000

铜虫 (小有名气)
循环数已经够多了，内参的话引物是常用的应该也没问题吧，很可能是你的模板浓度太低了
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4楼2009-03-25 12:34:53
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