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虫子739

铁虫 (小有名气)

[交流] 内参很淡

请问高手,为什么我的RT-PCR后的内参条带很淡?PCR循环为35次,上下游引物各为0.5ul(浓度为20uM),Tm为52和55时条带都很淡。我用的是tubulin和18s。除了可能是引物不合适,还有其它原因吗?
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winnie1378

铁虫 (初入文坛)


reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖 3-23 12:19
试试再摸个合适的Tm吧
2楼2009-03-20 13:32:04
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虫子739

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by winnie1378 at 2009-3-20 13:32:
试试再摸个合适的Tm吧

谢谢回复!在引物TM以下的三个温度都试了,结果都那样。
3楼2009-03-23 11:36:08
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sail000000

铜虫 (小有名气)

循环数已经够多了,内参的话引物是常用的应该也没问题吧,很可能是你的模板浓度太低了
4楼2009-03-25 12:34:53
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