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fykxy_206

木虫 (正式写手)

[交流] 【求救】HPLC图同一标样的保留时间总是提前



这是我3次相同标样的HPLC图,保留时间总是提前,是不是机器出问题了?那个部分有问题呢?
高手指点, 急!!!
谢谢

[ Last edited by fykxy_206 on 2009-3-19 at 14:06 ]
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)


fykxy_206(金币+1,VIP+0):谢谢 3-20 08:46
流动相和温度是不是变化了。
2楼2009-03-19 16:31:25
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ynmyx

至尊木虫 (职业作家)

★ ★
fykxy_206(金币+1,VIP+0):谢谢 3-20 08:46
fykxy_206(金币+1,VIP+0):请问,你说的用洗通路的异丙醇,和甲醇是色谱级的还是分析纯的就可以? 3-20 09:09
你分别用异丙醇、水、甲醇以2.0ml/min的流速冲洗一下流路(注意:在冲洗时,要用管子替换换色谱柱)!
......别人笑我太疯癫,我笑他人看不穿;不见五陵豪杰墓,无花无酒锄作田!
3楼2009-03-19 16:45:40
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physiology


fykxy_206(金币+1,VIP+0):谢谢 3-20 08:46
柱子有没有换,柱子短保留时间就短;
柱压有没有变化,压力大了自然出峰时间提前;
系统是不是已经平衡好了,系统平衡不好会出这样或者那样的问题;
流动相里的各项比例关系有没有变化?
还有,配好的乙腈溶液存放时间长了,乙腈会挥发的,这样流动相里面的乙腈比例下降,流动相的极性增加(流动相有水的情况下)所以出峰就会提前。
流动相脱气最好用真空泵,这样完全,超声处理只能除去30%的气体
保留时间提前不大的情况下,峰的情况还好就可以。
仅供参考
4楼2009-03-19 16:49:33
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fykxy_206

木虫 (正式写手)

我是在任何情况都没有变化的情况下,连续的进行 的3次相同的实验,以前做的时候保留时间都很一致,现在就出现这种情况了。3次试验几乎都是在同一个水平下做的。 我在想是不是机器出现故障的原因?帮我分析一下吧!


3楼的说冲洗一下流路是怎么回事?能说的具体点吗?(操作过程)我刚刚接触HPLC。
谢谢
5楼2009-03-19 18:08:24
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physiology8198


fykxy_206(金币+1,VIP+0):谢谢 3-20 08:46
你有没有观察过柱压的变化!应该是柱压在上升导致的
6楼2009-03-19 19:41:10
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