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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求救】HPLC图同一标样的保留时间总是提前
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fykxy_206

木虫 (正式写手)

[交流] 【求救】HPLC图同一标样的保留时间总是提前



这是我3次相同标样的HPLC图，保留时间总是提前，是不是机器出问题了？那个部分有问题呢？
高手指点， 急！！！
谢谢

[ Last edited by fykxy_206 on 2009-3-19 at 14:06 ]
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1楼 2009-03-19 14:03:21
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
★
fykxy_206(金币+1,VIP+0):谢谢 3-20 08:46
流动相和温度是不是变化了。
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2楼2009-03-19 16:31:25
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ynmyx

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
fykxy_206(金币+1,VIP+0):谢谢 3-20 08:46
fykxy_206(金币+1,VIP+0):请问，你说的用洗通路的异丙醇，和甲醇是色谱级的还是分析纯的就可以？ 3-20 09:09
你分别用异丙醇、水、甲醇以2.0ml/min的流速冲洗一下流路（注意：在冲洗时，要用管子替换换色谱柱）！
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......别人笑我太疯癫，我笑他人看不穿；不见五陵豪杰墓，无花无酒锄作田！
3楼2009-03-19 16:45:40
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physiology

★
fykxy_206(金币+1,VIP+0):谢谢 3-20 08:46
柱子有没有换，柱子短保留时间就短；
柱压有没有变化，压力大了自然出峰时间提前；
系统是不是已经平衡好了，系统平衡不好会出这样或者那样的问题；
流动相里的各项比例关系有没有变化？
还有，配好的乙腈溶液存放时间长了，乙腈会挥发的，这样流动相里面的乙腈比例下降，流动相的极性增加（流动相有水的情况下）所以出峰就会提前。
流动相脱气最好用真空泵，这样完全，超声处理只能除去30%的气体
保留时间提前不大的情况下，峰的情况还好就可以。
仅供参考
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4楼2009-03-19 16:49:33
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fykxy_206

木虫 (正式写手)
我是在任何情况都没有变化的情况下，连续的进行 的3次相同的实验，以前做的时候保留时间都很一致，现在就出现这种情况了。3次试验几乎都是在同一个水平下做的。 我在想是不是机器出现故障的原因？帮我分析一下吧！


3楼的说冲洗一下流路是怎么回事？能说的具体点吗？（操作过程）我刚刚接触HPLC。
谢谢
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5楼2009-03-19 18:08:24
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physiology8198

★
fykxy_206(金币+1,VIP+0):谢谢 3-20 08:46
你有没有观察过柱压的变化！应该是柱压在上升导致的
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6楼2009-03-19 19:41:10
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