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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » WB检测细胞中某个蛋白的磷酸化水平
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8095172666

银虫 (小有名气)

[求助] WB检测细胞中某个蛋白的磷酸化水平 已有1人参与

想用WB检测酵母细胞中某个蛋白的磷酸化水平，实验室没有相关基础打算送给外面公司做。打算是先用蛋白特异性抗体做WB，然后在膜上检测该蛋白的磷酸化。已有该蛋白对应的抗体，但是这个磷酸化抗体没有找到，看文献中好像都是用的对应蛋白的特异性磷酸化抗体。我这个用一般性的磷酸化抗体可以吗？
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1楼 2018-04-10 19:39:24
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棍子168

至尊木虫 (著名写手)
你们是哪个地区的，针对这种磷酸化水平的检测，你可以搜一下protein se公司的nanopro1000这个仪器

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天道酬勤
2楼2018-04-10 22:15:13
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8095172666

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 棍子168 at 2018-04-10 22:15:13
你们是哪个地区的，针对这种磷酸化水平的检测，你可以搜一下protein se公司的nanopro1000这个仪器

南京，你说的是打质谱吗?
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3楼2018-04-10 22:23:53
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棍子168

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 8095172666 at 2018-04-10 22:23:53
南京，你说的是打质谱吗?...

不是，wb的方法

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天道酬勤
4楼2018-04-10 22:24:26
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8095172666

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 棍子168 at 2018-04-10 22:24:26
不是，wb的方法
...

能不能给我说下大概的什么原理、流程啊？谢谢
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5楼2018-04-10 22:27:23
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水木川叶

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2018-04-18 08:26:39
价格上：外包公司做的价格差不多可以订一支磷酸化抗体了，所以不划算，慎用外包；
质量上：国内的生物外包公司很不规范，而且外包做的结果可能与你的满意度相差甚远，慎用外包；

再说买抗体，一支小包装的磷酸化抗体也不贵，Abcam或者CST的抗体质量都比较稳定，国内的巴傲得也还行，楼主自行比较，但慎用santa的抗体，掺水太严重，那么大一管看着很爽，用起来1:200的稀释度让人很无语，而且背景信号比较强
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6楼2018-04-17 16:35:14
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8095172666

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 水木川叶 at 2018-04-17 16:35:14
价格上：外包公司做的价格差不多可以订一支磷酸化抗体了，所以不划算，慎用外包；
质量上：国内的生物外包公司很不规范，而且外包做的结果可能与你的满意度相差甚远，慎用外包；

再说买抗体，一支小包装的磷酸化 ...

你的意思是说不用蛋白特异性的磷酸化抗体吗？
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7楼2018-04-18 21:44:15
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水木川叶

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 8095172666 at 2018-04-18 21:44:15
你的意思是说不用蛋白特异性的磷酸化抗体吗？...

……
你这理解能力
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8楼2018-04-19 16:13:40
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