24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 693  |  回复: 4
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

beisimai895

木虫 (小有名气)

[交流] 关于测质粒浓度

本人在做同源重组,要把质粒转入宿主菌,现在碰到的问题是:同源时要求较高浓度的质粒,所以每次提质粒,为了保证质粒的量的要求,都用20微升的TE溶解,测质粒浓度时只取5微升稀释到3毫升,但是这样测出的值不在0.2~0.8之间,估计是稀释倍数太高的原因,但是我又不能拿太多的质粒去稀释,想向各位请教一下,如何才能不用太多质粒又能准确的测出质粒的浓度呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beisimai895

木虫 (小有名气)

我每次都 是提20管,每管5毫升,最后混合为一管,用20微升TE溶解的,
5楼2009-03-18 08:31:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

allen8368

木虫 (正式写手)

方法一:换一台机器测  我只能说你的机器有点落后
方法二:可以不用稀释到3ml  注意看你的机器的光源在什么位置 试试看可以用尽量少的体积使其达到光源位置就可以了
方法三:同时提取2到3管质粒 混在一起 不就有50-60ul质粒啦 多一点稀释就好了
慢慢的认识你,再慢慢的忘记你...........
2楼2009-03-17 10:46:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beisimai895

木虫 (小有名气)

敢问楼上,有什么先进的仪器吗?说说,我看看能不能找到.我每次都是提20管质粒的,每管5微升,用试剂盒提的,不知道保守估计量大概有多少?
3楼2009-03-17 10:57:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

allen8368

木虫 (正式写手)

我们实验室使用的beckman DU800 测核酸时体积为80微升 我一般使用2微升稀释40倍或者4微升稀释20倍
另外还有一台最新的Thermo 一般直接用2微升测量不用稀释 我想使用1微升可能也行
使用试剂盒提质粒效率很高啊 当然这和菌株还是有很大关系的  普通的大肠杆菌提取60ul洗脱浓度总该能达到100ng每微升吧
慢慢的认识你,再慢慢的忘记你...........
4楼2009-03-17 15:42:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +4 举个栗子oi 2026-03-24 5/250 2026-03-26 23:15 by 不吃魚的貓
[考研] 349求调剂 +4 杰斯塔里斯 2026-03-21 4/200 2026-03-26 23:11 by 不吃魚的貓
[考研] 304材料求调剂 +3 钟llll 2026-03-26 3/150 2026-03-26 23:05 by Dyhoer
[考研] 一志愿武汉理工,总分321,英一数二,求老师收留。 +3 nnnnnnn5 2026-03-25 3/150 2026-03-26 22:38 by 不吃魚的貓
[考研] 321求调剂 +5 材料cailiao 2026-03-21 5/250 2026-03-26 20:41 by fmesaito
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂推荐 +4 清酒714 2026-03-26 5/250 2026-03-26 17:49 by fmesaito
[考研] 考研调剂 +8 小蜡新笔 2026-03-26 8/400 2026-03-26 16:18 by dick_runner
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 考研调剂 +6 来好运来来来 2026-03-21 7/350 2026-03-25 22:43 by 418490947
[考研] 求调剂323材料与化工 +4 1124361 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:19 by shulmg
[考研] 299求调剂 +7 shxchem 2026-03-20 9/450 2026-03-25 10:41 by lbsjt
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见