24小时热门版块排行榜    

查看: 905  |  回复: 13
当前主题已经存档。

wangxuan

木虫 (著名写手)

[交流] PCR产物不能连T载体

我最近作反向PCR,扩增出的片段老是连不上T载体,请高手帮帮忙,不胜感激
(我回收的片段比较亮的,不应该练不上的阿)
回复此楼

» 猜你喜欢

在其位,谋其政,成其事
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zl382

铁虫 (小有名气)

用什么酶扩得,如果不是Taq酶扩的,要补A后再连接T载体!
后退,绝对是无路可走!
2楼2009-03-16 16:37:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangxuan

木虫 (著名写手)

我用的宝公司的ExTaq酶,一般情况下肯定能加上A尾巴的
在其位,谋其政,成其事
3楼2009-03-16 16:56:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

takara的T载体效果不好,promega的T-easy是最好的
4楼2009-03-16 19:38:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoxingjun2008

金虫 (正式写手)

如果是用Pfu扩增的话,如何在反应完了之后加A啊?
5楼2009-03-17 16:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

livacin

铁虫 (正式写手)

继续学习中
6楼2009-04-08 10:43:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjb725

不是说一般takara的酶不加A的吗?
7楼2009-04-08 15:15:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

allen8368

木虫 (正式写手)

takara的酶也有些是扩增之后不加A的 这个用之前要仔细看看说明书
慢慢的认识你,再慢慢的忘记你...........
8楼2009-04-08 15:54:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amilie030312

金虫 (正式写手)

只要是Taq-bace的酶就是3‘加A的末端,如果是pfu-bace的酶那么一般都是3‘平末端的,混合酶就是混合末端的,如果想克隆入T载体那么必须有3’加A末端才能成功克隆,所以如果选用的是pfu-bace的酶则需要做一下3‘加A的实验才能做TA克隆。
9楼2009-04-08 16:45:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008116068

木虫 (著名写手)

LATaq酶就不用加A了
只要踮起脚尖,就离太阳更近一点!!!
10楼2009-04-19 23:29:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wangxuan 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 11/550 2026-03-25 16:17 by 87639
[考研] 求调剂323材料与化工 +4 1124361 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:19 by shulmg
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 0854 考研调剂 招生了!AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +7 holy J 2026-03-21 7/350 2026-03-24 17:24 by xiaohai104
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 352求调剂 +3 大米饭! 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123!
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见